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考马斯亮蓝法测蛋白质含量吸光度
用
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
是什么?
答:
考马斯亮蓝
g-250(coomassie brilliant blue g-250)
测定蛋白质含量
属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝g-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与...
关于
考马斯亮蓝
G-250
法测定蛋白质
的
含量
问题
答:
考马斯亮蓝
G-250
法测定蛋白质的含量
一般测定范围在0-1000mg/l,所以要把你做的豆芽匀浆的
蛋白质含量
控制在此范围内才能测定准确,样品
吸光度
在0.2-0.6范围内较理想.
简述
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
的过程
答:
简述
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
的过程如下:1、试剂准备:考马斯亮蓝G-250染料需要提前溶解,通常使用乙醇和缓冲液混合配制。同时,需要准备标准蛋白溶液,用于制作标准曲线。2、样本处理:将待测样本与缓冲液混合,然后用组织匀浆器匀浆,保证样本均匀。3、反应:将样本与考马斯亮蓝G-250染料混合,放入...
考马斯亮蓝法测定蛋白质
标准曲线
答:
1.
考马斯亮蓝
试剂:考马斯亮蓝G一250100mg溶于50ml95%乙醇,加入100ml85%H;PO4,加蒸馏水稀释至 1000ml滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G-250.4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)HPO4。2.标准
蛋白质
溶液:纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮
法测定蛋白
氮
含量
,根据其纯度同0.15...
考马斯亮蓝
G-250
法测定蛋白质含量
的原理是什么?
答:
考马斯亮蓝
G-250(Coomassie brilliant blue G-250)
测定蛋白质含量
属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250...
在
考马斯亮蓝法测定
天麻中
蛋白质含量
的
吸光度
为什么要在标曲范围内...
答:
考马斯亮蓝法
应尽量使用与待测样本性质相近的
蛋白质
作为标准品,例如测定抗体,可用纯化的抗体作为标准。如果待测样本是未知的,也可用抗体作为标准蛋白。通常在20ug到150ug/100ul之间绘制标准曲线。一般情况,当溶液中的蛋白质浓度增加时,显色液在595nm处的
吸光度
基本能保持线性增加,因此可以用考马斯...
考马斯亮蓝法测蛋白质
时为什么浓度越高而
吸光度
越低
答:
吸光值是正的,浓度是负的话,应该和你做的标准曲线有关系,建议重新做下标准曲线,r值最起码得有两个9吧。还有就是,你的
蛋白
浓度肯定比较低,所以你可以把标准品做个浓度比较低的曲线。
考马斯亮蓝法测蛋白质
浓度范围为多少
答:
蛋白质
本身的
吸光度
应该是在280nm 和考蓝反应后才会在595nm处有吸收,这个吸收值和浓度肯定是线性的关系 感觉你这个蛋白浓度算的很奇怪,既然知道蛋白总量50微克,为什么还要加考蓝呢,直接除以溶液体积就可以了啊。考蓝一般是和已知浓度的标准蛋白(比如BSA)用来测未知浓度蛋白的。需要通过标准蛋白做一条...
考马斯亮蓝法测蛋白质含量
答:
1、原理
考马斯亮蓝
(Coomassie Brilliant Blue)
法测定蛋白质
浓度,是利用蛋白质—染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质
测定法
具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与...
bradford
法测定蛋白质含量
的原理是什么?应如何克服不利因素对测定的影响...
答:
bradford
法测定蛋白质含量
的原理是
考马斯亮蓝
G250与蛋白质结合可以显色,用分光光度计在
吸光度
595nm处读数,通过标准蛋白与G250结合显色建立标准曲线,再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。不利因素主要是特殊蛋白的结构,缓冲液组分中有干扰试剂等。双缩脲法和Folin—酚试剂法...
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