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考马斯亮蓝测蛋白质
什么是
考马斯亮蓝
g-250测?
答:
考马斯亮蓝
g-250(coomassie brilliant blue g-250)
测定蛋白质
含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝g-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与...
考马斯亮蓝
反应
答:
考马斯亮蓝
反应在游离状态下呈红色,通过疏水作用与
蛋白质
结合后呈蓝色。考马斯亮蓝化学性质:考马斯亮蓝有G-250和R-250两种。游离状态的考马斯亮蓝G250在酸性溶液中呈红棕色,与蛋白质结合后呈蓝色,蛋白质含量与颜色的深浅成正比,经595nm
测定
,可作出蛋白质含量与吸光度值的标准曲线,并求出未知样...
考马斯亮蓝
法
测定蛋白质
标准曲线
答:
一、试剂:1.
考马斯亮蓝
试剂:考马斯亮蓝G一250100mg溶于50ml95%乙醇,加入100ml85%H;PO4,加蒸馏水稀释至 1000ml滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G-250.4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)HPO4。2.标准
蛋白质
溶液:纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法
测定蛋白
氮含量,根据其...
简述
考马斯亮蓝
法
测定蛋白质
含量的过程
答:
简述
考马斯亮蓝
法
测定蛋白质
含量的过程如下:1、试剂准备:考马斯亮蓝G-250染料需要提前溶解,通常使用乙醇和缓冲液混合配制。同时,需要准备标准蛋白溶液,用于制作标准曲线。2、样本处理:将待测样本与缓冲液混合,然后用组织匀浆器匀浆,保证样本均匀。3、反应:将样本与考马斯亮蓝G-250染料混合,放入...
考马斯亮蓝
法的优缺点
答:
根据查询智慧城市网,嘉峪检测网得知,
考马斯亮蓝
法是一种常用的
测定蛋白质
浓度的方法,它的优点是:1、灵敏度高,可以检测到微量的蛋白质,最低检测量可达1微克。2、操作简单,只需加入一种试剂,反应时间短,颜色稳定。3、干扰物质少,许多对其他方法有干扰的物质,如糖、缓冲液、还原剂和络合剂等...
考马斯亮蓝
与
蛋白质
结合原理
答:
考马斯亮蓝
显色法的基本原理是根据蛋白质可与考马斯亮蓝G-250定量结合。方法简介:考马斯亮蓝G-250(CoomassiebrilliantblueG-250)
测定蛋白质
含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收...
紫外分光光度法和
考马斯亮蓝
法得出的待
测蛋白质
含量呈现怎样的差异...
答:
原理差异:紫外分光光度法是根据
蛋白质
分子中的共轭双键在280nm波长处有最大吸收峰的特性,通过
测量
吸光度值来计算蛋白质含量的。而
考马斯亮蓝
法是一种染料结合法,利用考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合形成复合物,使染料在595nm波长处的吸光度值发生变化,从而计算出蛋白质含量。准确性差异:紫外分光光度...
考马斯亮蓝
法计算公式
答:
nh2ch2cooh+3h2so4—2co2+3so2+4h2o+nh3。
考马斯亮蓝
法
测蛋白质
计算公式:nh2ch2cooh+3h2so4—2co2+3so2+4h2o+nh3,考马斯亮蓝比色法是由Bradford等人建立的1种测定微量蛋白质的方法。
考马斯亮蓝
发
测蛋白质
含量时蛋白质变性后跟考马斯亮蓝反应有影响吗?
答:
考马斯亮蓝
G-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在465nm;当它与
蛋白质
结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比。若是变形后还能搅为均匀的分散在溶液中,影响相对较小 若是沉淀在光度计下不易透射,影响较大 ...
考马斯亮蓝
法
测定蛋白质
含量
答:
考马斯亮蓝
法是一种常用的
蛋白质
定量方法。考马斯亮蓝法是一种常用的蛋白质定量方法,原理是考马斯亮蓝G-250与蛋白质分子中的氨基发生显色反应,生成蓝色的复合物,其颜色深浅与蛋白质含量成正比。通过
测定
蓝色复合物的吸光度,可以计算出蛋白质含量。该方法具有快速、灵敏度高、操作简便等优点,适用于...
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