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蛋白质考马斯亮蓝
考马斯亮蓝
反应原理是什么?
答:
缩二脲反应、茚三酮反应和
考马斯亮蓝
反应都是与
蛋白质
有关的显色反应。以下是这些反应的基本原理:1、缩二脲反应:蛋白质中的肽键或含有两个或两个以上肽键的肽在碱性条件下与铜离子反应形成紫色络合物。2、茚三酮反应:蛋白质或氨基酸的游离氨基在弱酸条件下与茚三酮反应生成蓝紫色化合物,而脯氨酸...
考马斯亮蓝
法测定
蛋白质
标准曲线
答:
一、试剂:1.
考马斯亮蓝
试剂:考马斯亮蓝G一250100mg溶于50ml95%乙醇,加入100ml85%H;PO4,加蒸馏水稀释至 1000ml滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G-250.4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)HPO4。2.标准
蛋白质
溶液:纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其...
考马斯亮蓝
反应
答:
考马斯亮蓝
反应在游离状态下呈红色,通过疏水作用与
蛋白质
结合后呈蓝色。考马斯亮蓝化学性质:考马斯亮蓝有G-250和R-250两种。游离状态的考马斯亮蓝G250在酸性溶液中呈红棕色,与蛋白质结合后呈蓝色,蛋白质含量与颜色的深浅成正比,经595nm测定,可作出蛋白质含量与吸光度值的标准曲线,并求出未知样...
简述
考马斯亮蓝
法测定
蛋白质
含量的过程
答:
简述
考马斯亮蓝
法测定
蛋白质
含量的过程如下:1、试剂准备:考马斯亮蓝G-250染料需要提前溶解,通常使用乙醇和缓冲液混合配制。同时,需要准备标准蛋白溶液,用于制作标准曲线。2、样本处理:将待测样本与缓冲液混合,然后用组织匀浆器匀浆,保证样本均匀。3、反应:将样本与考马斯亮蓝G-250染料混合,放入...
用
考马斯亮蓝
法测定
蛋白质
含量是什么?
答:
brilliant blue g-250)测定
蛋白质
含量属于染料结合法的一种。
考马斯亮蓝
g-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝g-250结合在2min...
蛋白质
溶液中加入
考马斯亮蓝
溶液颜色不发生变化是为什么?
答:
考马斯亮蓝
(Coomassie Brilliant Blue)是一种常用的染色剂,可以与
蛋白质
结合形成复合物,从而在凝胶电泳等实验中可视化蛋白质。但是,如果蛋白质溶液中加入考马斯亮蓝溶液后颜色不发生变化,可能是因为以下原因:蛋白质浓度太低:考马斯亮蓝染色剂是一种对蛋白质比较敏感的染色剂,需要一定浓度的蛋白质...
考马斯亮蓝
与
蛋白质
结合原理
答:
考马斯亮蓝
显色法的基本原理是根据
蛋白质
可与考马斯亮蓝G-250定量结合。方法简介:考马斯亮蓝G-250(CoomassiebrilliantblueG-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收...
考马斯亮蓝
法的优缺点
答:
根据查询智慧城市网,嘉峪检测网得知,
考马斯亮蓝
法是一种常用的测定
蛋白质
浓度的方法,它的优点是:1、灵敏度高,可以检测到微量的蛋白质,最低检测量可达1微克。2、操作简单,只需加入一种试剂,反应时间短,颜色稳定。3、干扰物质少,许多对其他方法有干扰的物质,如糖、缓冲液、还原剂和络合剂等...
蛋白
中含有碱性氨基酸较少,能被
考马斯亮蓝
染色吗
答:
考马斯
亮兰G-250染料,在酸性溶液中与
蛋白质
结合,使染料的最大吸收峰(lmax)的位置,由465nm变为 595nm,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。研究发现,染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合。
考马斯亮蓝
法计算公式
答:
nh2ch2cooh+3h2so4—2co2+3so2+4h2o+nh3。
考马斯亮蓝
法测
蛋白质
计算公式:nh2ch2cooh+3h2so4—2co2+3so2+4h2o+nh3,考马斯亮蓝比色法是由Bradford等人建立的1种测定微量蛋白质的方法。
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