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考马斯亮蓝法测蛋白质含量吸光度
用
考马斯亮蓝法测定蛋白质
浓度,画出A(
吸光度
)c(浓度)标准曲线图以后怎么...
答:
有标准曲线就有比
吸光度
了(A/C)用待测样本的吸光度除以它就好
考马斯亮蓝吸光度
一直变化
答:
灵敏高。
考马斯亮蓝吸光度
一直变化的原因是灵敏高。考马斯亮蓝一定范围内与
蛋白质
浓度成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。
考马斯亮蓝法
的适用范围
答:
一般情况,当溶液中的蛋白质浓度增加时,显色液在 595nm 处的
吸光度
基本能保持线性增加,因此可以用
考马斯亮蓝
G-250 显色法来测定溶液中蛋白质的
含量
。长期以来,人们一直习惯用 Lowry 法来
测定蛋白质
浓度, 但近些年来, 越来越多的人开始用考马斯亮蓝 G-250显色法来测定蛋白质浓度,与 Lowry ...
采用
考马斯亮蓝测定
样品中的
蛋白质
浓度,常用来做标准物质的有
答:
考马斯
亮兰g-250染料,在酸性溶液中与
蛋白质
结合,使染料的最大吸收峰的位置(lmax),由465nm变为595nm,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。经研究认为,染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合。在595nm下测定的
吸光度
值a595,与蛋白质浓度成正比。bradford法的...
考马斯亮蓝
反应
答:
考马斯亮蓝
化学性质:考马斯亮蓝有G-250和R-250两种。游离状态的考马斯亮蓝G250在酸性溶液中呈红棕色,与蛋白质结合后呈蓝色,
蛋白质含量
与颜色的深浅成正比,经595nm测定,可作出蛋白质含量与
吸光度
值的标准曲线,并求出未知样品的蛋白质浓度。R-250呈蓝色,有轻微红色。染色如下:蛋白质与考马斯...
bradford
法测蛋白
浓度怎么测?
答:
测定:另取两支干净的试管(做一重复),加入合适浓度的待测样品,使其测定值在标准曲线的范围内,测定方法同上,由样品液的
吸光度
查标准曲线即可求出
含量
。注意事项:1、 如果要求严格,最好在试剂加入后的5~20min内测定光 吸收,因为这段时间内颜色是最稳定的。2、 若选择在旋涡混合器上混合,注意...
考马斯亮蓝法
实验中为什么要稀释牛乳
答:
考马斯亮蓝法
实验中牛乳的蛋白质过多,要进行稀释。在实验中,考马斯亮蓝在酸性溶液中呈红棕色,最大吸收峰在465nm。与蛋白质通过范德华力结合成复合物时变为蓝色,其最大吸收峰为595nm,蛋白质染料复合物在595nm处的
吸光度
与
蛋白质含量
成正比,故可用于蛋白质的定量测定。
考马斯亮蓝法测定蛋白质
浓度存在的误差?
答:
1、去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)和0.1N的NaOH会对实验结果有影响 2、标准曲线有轻微的非线性
考马斯亮蓝测定蛋白质
浓度是较常用的方法,误差可尽量减到最小,需注意:测定OD值前,将分光
光度
计提前预热至少30分钟,可保证准确性;配制好的考马斯亮蓝溶液应放于4度保存备用;盐...
bradford
法测蛋白
浓度怎么测?
答:
测定:另取两支干净的试管(做一重复),加入合适浓度的待测样品,使其测定值在标准曲线的范围内,测定方法同上,由样品液的
吸光度
查标准曲线即可求出
含量
。注意事项:1、 如果要求严格,最好在试剂加入后的5~20min内测定光 吸收,因为这段时间内颜色是最稳定的。2、 若选择在旋涡混合器上混合,注意...
蛋白质
样品加入
考马斯亮蓝
染色液后,测得的
吸光度
不在标准曲线的范围该数...
答:
不可靠。如果
吸光度
偏大,就稀释减少样品用量;偏小就多加样品。
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