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考马斯亮蓝法测蛋白质含量吸光度
紫外分光
光度法
和
考马斯亮蓝法
得出的待
测蛋白质含量
呈现怎样的差异...
答:
原理差异:紫外分光
光度法
是根据蛋白质分子中的共轭双键在280nm波长处有最大吸收峰的特性,通过
测量吸光度
值来计算
蛋白质含量
的。而
考马斯亮蓝法
是一种染料结合法,利用考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合形成复合物,使染料在595nm波长处的吸光度值发生变化,从而计算出蛋白质含量。准确性差异:紫外分光光度...
考马斯亮蓝法测蛋白质含量
答:
3、注意事项 在试剂加入后的5-20min内测定光吸收,因为在这段时间内颜色是最稳定的。测定中,
蛋白
-染料复合物会有少部分吸附于比色杯壁上,测定完后可用乙醇将蓝色的比色杯洗干净。利用
考马斯亮蓝法
分析蛋白必须要掌握好分光光度计的正确使用,重复
测定吸光度
时,比色杯一定要冲洗干净,制作蛋白标准...
可溶性
蛋白质含量
的
测定
答:
检测原理:
考马斯亮蓝
G-250(Coomassie brilliant blueG-250)
测定蛋白质含量
属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465nm,后者在595nm在一定蛋白质浓度范围内(1-1000μg)),蛋白质与色素结合物在595nm波长下的
吸光度
与...
考马斯亮蓝法测蛋白质
浓度范围为多少
答:
蛋白质
本身的
吸光度
应该是在280nm 和考蓝反应后才会在595nm处有吸收,这个吸收值和浓度肯定是线性的关系 感觉你这个蛋白浓度算的很奇怪,既然知道蛋白总量50微克,为什么还要加考蓝呢,直接除以溶液体积就可以了啊。考蓝一般是和已知浓度的标准蛋白(比如BSA)用来测未知浓度蛋白的。需要通过标准蛋白做一条...
您好,请教一下,我用的
考马斯亮蓝法测
污泥
蛋白质
,为什么样品比空白组...
答:
空白组是水?出现这个情况可能是你的样品中的
蛋白质含量
确实很低,低过一定浓度时,结果就没有参考价值了。也有可能是考蓝工作液存放时间太久失效了,可以用一些蛋白标准品(比如BSA)来检验一下考蓝工作液是否正常。如果要用缓冲液做空白组的话,就用和蛋白样品一样的缓冲液就可以了 ...
Bradford
法测定蛋白质含量
应如何克服不利因素对测定的影响?
答:
bradford
法测定蛋白质含量
,也就是
考马斯亮蓝法
,其原理是考马斯亮蓝在游离状态下呈棕红色,最大光吸收在488nm; 当它与蛋白质结合后变为蓝色,蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝结合在2min左右的时间内...
考马斯亮蓝法测蛋白质含量
答:
3、注意事项 在试剂加入后的5-20min内测定光吸收,因为在这段时间内颜色是最稳定的。测定中,
蛋白
-染料复合物会有少部分吸附于比色杯壁上,测定完后可用乙醇将蓝色的比色杯洗干净。利用
考马斯亮蓝法
分析蛋白必须要掌握好分光光度计的正确使用,重复
测定吸光度
时,比色杯一定要冲洗干净,制作蛋白标准...
用于
蛋白质测量
的染料
答:
000μg/ml,是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。考马斯亮蓝有g250和r250两种。其中考马斯亮蓝g250由于与蛋白质的结合反应十分迅速,常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝r250与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是可以被洗脱下去,所以可以用来对电泳条带染色。
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
流程 该方法用于...
考马斯亮蓝
与
蛋白质
的哪个区域结合
答:
一般情况,当溶液中的蛋白质浓度增加时,显色液在 595nm 处的
吸光度
基本能保持线性增加,因此可以用
考马斯亮蓝
G-250 显色法来测定溶液中蛋白质的
含量
。长期以来,人们一直习惯用 Lowry 法来
测定蛋白质
浓度, 但近些年来, 越来越多的人开始用考马斯亮蓝 G-250显色法来测定蛋白质浓度,与 Lowry ...
植物细胞骨架观察中
考马斯亮蓝
有什么用
答:
000μg/ml,是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。考马斯亮蓝有g250和r250两种。其中考马斯亮蓝g250由于与蛋白质的结合反应十分迅速,常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝r250与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是可以被洗脱下去,所以可以用来对电泳条带染色。
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
流程 该方法用于...
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