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蛋白质考马斯亮蓝
考马斯亮蓝
测定
蛋白质
含量时应注意什么?
答:
在试剂加入后的5-20min内测定光吸收,因为在这段时间内颜色是最稳定的。测定中
蛋白
-染料复合物会有少部分吸附于比色杯壁上,测定完后可用乙醇将蓝色的比色杯洗干净。利用
考马斯亮蓝
法分析蛋白必须要掌握好分光光度计的正确使用,重复测定吸光度时,比色杯一定要冲洗干净,制作蛋白标准曲线的时候,蛋白...
考马斯亮蓝
法测
蛋白质
含量原理
答:
其光吸收值与
蛋白质
含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与
考马斯亮蓝
G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白...
与凯氏定氮法相比,
考马斯亮蓝
测定
蛋白质
含量的优点
答:
1.
蛋白质
与
考马斯亮蓝
G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;2.其结合物在室温下1h内保持稳定。3.该法试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为0~1,000μg/mL,是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。
考马斯亮蓝
与pas染色液反应
答:
蛋白质
与
考马斯亮蓝
G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为0~1 000μg/mL,是一种常用的微量蛋白质快速...
考马斯亮蓝
法测
蛋白质
含量是多少?
答:
考马斯亮蓝
法测
蛋白质
含量是0~1 000μg/mL。考马斯亮蓝一定范围内与蛋白质浓度成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。测定含量:该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的,但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0.2%影响测定结果,如TritonX-100、SDS、NP-40等...
请问
考马斯亮蓝
法能否测定不溶性
蛋白质
,为什么?
答:
其光吸收值与
蛋白质
含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与
考马斯亮蓝
G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白...
考马斯亮蓝
是什么?
答:
Bradford)
蛋白质
定量试剂的主要成分。
考马斯亮蓝
G-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在465nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比。考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是可以被洗脱下去,所以可以用来对电泳条带染色。
考马斯亮蓝
法测定
蛋白质
标准曲线
答:
一、试剂:1.
考马斯亮蓝
试剂:考马斯亮蓝G一250100mg溶于50ml95%乙醇,加入100ml85%H;PO4,加蒸馏水稀释至 1000ml滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G-250.4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)HPO4。2.标准
蛋白质
溶液:纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其...
考马斯亮蓝
法测
蛋白质
含量
答:
考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与
蛋白质
结合,使染料的最大吸收峰(lmax)的位置,由465nm变为595nm,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。研究发现,染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合。
考马斯亮蓝
...
考马斯亮蓝
法测
蛋白质
含量原理
答:
考马斯亮蓝
法测定
蛋白质
浓度的原理考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰G-250...
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