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转化摇菌后不能及时涂板
大肠杆菌工程菌,我
摇菌
摇的出来 涂平板不出来了 这是什么原因
答:
你可以做个涂片镜检以下。毕竟你的摇瓶摇了19小时,已经到了稳定期的后期了呢,
菌
体数量有十的十次方左右了。如果你的目的是要得到单菌落,那就应该把你的摇瓶种子液进行10倍梯度稀释,取负七、负八、负九三个稀释度进行涂布,才会出来单菌落。2、虽然可能性不大,但是还是有这个可能,就是你同学...
...放几天再
转化
?2.转化后摇的
菌
可
不可以
在4度过几天
涂板
?
答:
转化的菌应该也可以放4度过几天涂板,但时间不能长,个人建议不要超过两天
,可能影响菌的活力和产生杂菌污染。;因为一般菌体4度都会沉底,而且何况是转化之后的感受态,基本上都是死菌。
涂板
之前用kan的LB
摇菌
怎么办
答:
3. LB/Amp/IPTG/X-gal 培养基在含 100 µg/mL Amp 的 LB 琼脂平板上加入 40 µL X-gal 贮存液和 40 µL IPTG 溶液,用无菌玻璃涂布器把溶液均匀涂布于整个平板表面,超净工作台上吹干后备用。4. SOC 液体培养基Tryptone20 gYeast Extract5 gNaCl0.5 g加入 950 mL 水...
电
转化
酵母后,涂布YPDS平板仅有少数单克隆出现,挑单科,
摇菌
诱导...
答:
1,挑选
转化
子做菌落PCR验证待表达基因是否连接成功。2,如果步骤1为阳性,检测设计的表达元件是否合适,密码子偏爱性等问题。
瞎忙活
不
如不忙活
答:
3. 小全倒的板含有抗生素,误用了小全倒的板做抑菌圈,结果未能涨
菌
。4. 由于稀释有误,平板抗菌实验全部无菌生长(先稀释了4次,混合后摇了约10h,稀释4次,
涂板
无菌)5. 下午做实验时已经发现无菌管很少了,妹
及时
你的。晚饭后也没想着灭,晚九点去做实验,由于2ml无菌管
不
够用,导致前一天孵育...
农杆
菌转化后涂
平板,长出了单克隆,想要活化单克隆然后抽质粒,但是怎 ...
答:
可能是平板有问题,也就是说平板上长的单克隆
不
是需要的抗性;可以用新鲜平板划线,如果能长,再从新平板上挑单克隆
摇菌
;如果不长,说明原来平板上的单克隆不对。
经
转化
的感受态细胞,涂完板后,还有剩余的
菌
液,为什么是放在-4度保存...
答:
一般,我们做实验,剩余对的菌液是
不会
再用的,一是不靠谱,二是若是涂的板没长单菌落的话,那么这个剩余的菌液也就没什么作用了:若是长出了,大可以抽提质粒,下次用时再转,或者
摇菌后
用甘油保种,下次用时可选择划线,也可以直接摇菌。。。个人感觉那个剩余的菌液,不存也罢。。不知道你...
菌落长了一个很大的
菌
答:
不
一定是污染,可能是菌落长得好,或者菌太多。感觉是涂多了,如果
转化
效率高,50ul足以。另外,涂完后最好把板子吹干后再放到培养箱。
涂板
前把板子正置37度温箱烤烤,就是转化完
摇菌
恢复抗性的这段时间。涂板时少加点菌液,很快就干了,最好打开超净台的吹风机。长的太多就做个阴性对照,试试你...
质粒DNA的
转化
实验中在含Amp的选择性培养基上出现菌落,但阴性对照也 ...
答:
如果这样,你的平板就相当于是无抗的。2,无菌操作失误,带入了其他有抗性的杂菌。3,你的空菌被转入质粒的菌污染了。或者你的菌本身有污染。鉴定的方法很简单,重点是你的阴性对照菌。做个菌落pcr看有没有目的带,或者直接挑单菌落用amp培养基(要保证
不
失活)
摇菌
过夜看长不长。
转化后
涂布,阴性对照培养皿上长有一两个菌落,能否继续在阳性平皿上...
答:
阴性平板上长几个克隆一般的原因是抗性板是筛选压力稍有
不
足。出现这种情况的原因可能是抗生素母液部分失效或者到平板时加抗生素时培养基的温度过高。你可以用新鲜的抗生素母液重新配置抗性板,如果还出现这种情况,还有可能是感受态细胞的问题。如果阳性实验平板上长的克隆比较多,可以继续挑单克隆
摇菌
做进一步...
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转化后立即涂板子
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