为什么SDS- PAGE电泳中浓缩胶的pH值比分离胶高？

Question

如题所述

Answer 1

在SDS-PAGE中，分离胶和浓缩胶中tris-Hcl的pH值不同，主要是因为它们的作用和配方不同。
分离胶的主要作用是分离蛋白质，它的配方中含有更高浓度的Tris-Hcl，pH范围在8.9左右。这种高pH环境有助于使蛋白质更好地分离，因为蛋白质的带电性会随着pH值的升高而改变，使它们更容易在电场中移动。同时，高pH值也有助于破坏分子间的氢键，使蛋白质更容易解离成单个亚基。
浓缩胶的主要作用是浓缩蛋白质样品，它的配方中含有较低浓度的Tris-Hcl，pH范围在6.7左右。这种低pH环境有助于使甘氨酸在电场中移动得更慢，从而在进入分离胶之前将样品浓缩。同时，低pH值也有助于使蛋白质在电场中保持稳定，减少谱带扩散。
因此，通过调整分离胶和浓缩胶中的Tris-Hcl浓度和pH值，可以优化蛋白质的分离和浓缩效果。