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蛋白质标准曲线图595nm
考马斯亮蓝法测
蛋白质
含量
答:
考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与
蛋白质
结合,使染料的最大吸收峰(lmax)的位置,由465nm变为
595nm
,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。2、步骤 制作
标准曲线
取7支试管,按下表平行操作。试管编号 0 1 2 3 4 5 6
标准蛋白
溶液(mL)...
考马斯亮蓝法测定
蛋白质标准曲线
答:
2.标准
蛋白质
溶液:纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。二、器材:722S型分光光度计使用及原理,移液管使用 三、
标准曲线
制作:1.以A
595nm
为纵坐标,
标准蛋白含量
为横坐标(六个点为10ug、20ug、40ug、50ug、60ug),在...
考马斯亮蓝法测定牛血清
蛋白
的
标准曲线
!!
答:
(三)、
标准曲线
制作:试管编号 0 1 2 3 4 5 6 100ug/ml
标准蛋白
(ml) 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.15mol/L NaCl (ml) 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 考马斯亮蓝试剂 (ml) 5 5 5 5 5 5 5 摇匀,1h内以1号管为空白对照,在
595nm
处比色 A595nm 1...
考马斯亮蓝法测定牛血清
蛋白
的
标准曲线
?
答:
(三)、
标准曲线
制作:试管编号 0 1 2 3 4 5 6 100ug/ml
标准蛋白
(ml) 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.15mol/L NaCl (ml) 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 考马斯亮蓝试剂 (ml) 5 5 5 5 5 5 5 摇匀,1h内以1号管为空白对照,在
595nm
处比色 A595nm 1...
bradford法测
蛋白
浓度怎么测?
答:
测定:另取两支干净的试管(做一重复),加入合适浓度的待测样品,使其测定值在
标准曲线
的范围内,测定方法同上,由样品液的吸光度查标准曲线即可求出含量。注意事项:1、 如果要求严格,最好在试剂加入后的5~20min内测定光 吸收,因为这段时间内颜色是最稳定的。2、 若选择在旋涡混合器上混合,注意...
bradford法测
蛋白
浓度怎么测?
答:
测定:另取两支干净的试管(做一重复),加入合适浓度的待测样品,使其测定值在
标准曲线
的范围内,测定方法同上,由样品液的吸光度查标准曲线即可求出含量。注意事项:1、 如果要求严格,最好在试剂加入后的5~20min内测定光 吸收,因为这段时间内颜色是最稳定的。2、 若选择在旋涡混合器上混合,注意...
为什么制作
蛋白质标准曲线
答:
制作
蛋白质标准曲线
是为了学习考马斯亮蓝(CoomassieBrilliantBlue)法测定蛋白质浓度的原理和方法。制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定...
考马斯亮蓝法测
蛋白质
含量原理
答:
将
蛋白质
样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合,测量在
595 nm
处的吸收值,在建立由一系列稀释的BSA建立的
标准曲线
的情况下,蛋白质的浓度可以根据标准曲线而确定。考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与...
可溶性
蛋白质
含量的测定
答:
管号123456
蛋白质标准
液(ml)00.200.400.600.801.00蒸馏水(ml)1.000.800.600.400.200蛋白质含量(μg)020406080100在每支试管中加入5Ml考马斯亮蓝G-250溶液,盖塞,反转混合数次,放置2Min后,用1CM光径比色杯在
595nM
下比色。以蛋白质浓度为横坐标,以吸光值为纵坐标绘制
标准曲线
。
考马斯亮蓝G-250法测定
蛋白质
含量的原理是什么?
答:
3.将待测样本溶于缓冲溶液中,该缓冲溶液应与制作
标准曲线
的缓冲溶液相同(最好用PBS)。4.按1:5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液,如出现沉淀,过滤除去。5.每个样本加5ml稀释的染料结合溶液,作用5~30min。染液与
蛋白质
结合后,将由红色变为蓝色,在
595nm
波长下测定其吸光度。注意,显色反应不得超过...
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