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蛋白质标准曲线图595nm
savag法除
蛋白质
后,怎么检测样品中蛋白质的含量?
答:
0.5mg牛血清蛋白/ml溶液的A595约为0.50。2. 微量法 当样品中
蛋白质
浓度较稀时(10-100mg/ml),可将取样量(包括补加的水)加大到0.5ml或1.0ml, 空白对照则分别为0.5ml或1.0ml H2O, 考马斯亮蓝G-250试剂仍加5.0ml, 同时作相应的
标准曲线
,测定
595nm
的光吸收值。0.05mg牛血清蛋白/...
考马斯亮蓝测定
蛋白质
的原理是什么
答:
3、将待测样本溶于缓冲溶液中,该缓冲溶液应与制作
标准曲线
的缓冲溶液相同(最好用PBS)。4、按1:4用蒸馏水稀释浓染料结合溶液,如出现沉淀,过滤除去。5、每个样本加5ml稀释的染料结合溶液,作用5~30min。染液与
蛋白质
结合后,将由红色变为蓝色,在
595nm
波长下测定其吸光度。注意,显色反应不得超过...
考马斯亮蓝G-250法测定
蛋白质
含量的原理是什么?
答:
3.将待测样本溶于缓冲溶液中,该缓冲溶液应与制作
标准曲线
的缓冲溶液相同(最好用PBS)。4.按1:5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液,如出现沉淀,过滤除去。5.每个样本加5ml稀释的染料结合溶液,作用5~30min。染液与
蛋白质
结合后,将由红色变为蓝色,在
595nm
波长下测定其吸光度。注意,显色反应不得超过...
考马斯亮蓝法测
蛋白质
含量原理
答:
考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与
蛋白质
结合,使染料的最大吸收峰(lmax)的位置,由465nm变为
595nm
,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。研究发现,染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合。
bradford法测定
蛋白质
含量?
答:
bradford法测定
蛋白质
含量,也就是考马斯亮蓝法,其原理是考马斯亮蓝在游离状态下呈棕红色,最大光吸收在488nm; 当它与蛋白质结合后变为蓝色,蛋白质—色素结合物在
595nm
波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝结合在2min左右的时间内...
考马斯亮蓝测定固体物质
蛋白质
含量
答:
表1 低浓度
标准曲线
制作 管 号 1 2 3 4 5 6 1 000μg/mL
标准蛋白
液(mL)0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 蒸馏水(mL)1.00 0.98 0.96 0.94 0.92 0.90 考马斯亮蓝G-250试剂(mL)5 5 5 5 5 5
蛋白质
含量(μg)0 20 40 60 80 100 OD
595nm
(2)0~1 000...
考马斯亮蓝测定
蛋白质
的原理是什么
答:
需要注意的是,不同
蛋白质
与考马斯亮蓝G-250的结合能力可能存在差异,因此在制作
标准曲线
时,通常选择与待测样品性质相近的蛋白质作为标准品,以减少测定偏差。综上所述,考马斯亮蓝测定蛋白质的原理是基于蛋白质与考马斯亮蓝G-250染料的结合反应,通过测定光吸收值来定量测定蛋白质的含量。这种方法操作...
简述考马斯亮蓝法测定
蛋白质
含量的过程
答:
2、样本处理:将待测样本与缓冲液混合,然后用组织匀浆器匀浆,保证样本均匀。3、反应:将样本与考马斯亮蓝G-250染料混合,放入沸水浴中加热10分钟,使染料与
蛋白质
充分结合。4、冷却:将反应液冷却至室温。5、测定吸光度:在
595nm
处测定反应液的吸光度值。6、计算:根据
标准曲线
和吸光度值计算蛋白质...
食品中
蛋白质
含量怎么测?
答:
蛋白质
―染料复合物具有很高的消光系数,使得在测定蛋白质浓度时灵敏度很高,在测定溶液中含蛋白质5µL/ml时就有0.275光吸收值的变化,比Lowry法灵敏4倍,测定范围为10-100µg蛋白质,微量测定法测定范围是1-10µg蛋白质。此反应重复性好,精确度高,线性关系好。
标准曲线
在蛋白质...
考马斯亮蓝法测
蛋白质
浓度范围为多少
答:
和考蓝反应后才会在
595nm
处有吸收,这个吸收值和浓度肯定是线性的关系 感觉你这个蛋白浓度算的很奇怪,既然知道蛋白总量50微克,为什么还要加考蓝呢,直接除以溶液体积就可以了啊。考蓝一般是和已知浓度的
标准蛋白
(比如BSA)用来测未知浓度蛋白的。需要通过标准蛋白做一条
标准曲线
,再把未知浓度蛋白的吸收...
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