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蛋白质标准曲线图595nm
考马斯亮蓝G250法测
蛋白质
含量比其他方法有什么优点?
答:
是一种常用的微量
蛋白质
快速测定方法。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在
595nm
波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。
采用考马斯亮蓝测定样品中的
蛋白质
浓度,常用来做
标准
物质的有
答:
在
595nm
下测定的吸光度值a595,与
蛋白质
浓度成正比。bradford法的突出优点是:(1)灵敏度高,据估计比lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比lowry法要大的多。(2)...
酶的提取:固液比1:5,20℃提取30分钟,共提取三次如何操作?
答:
(1)
蛋白质标准曲线
制作取14支试管,分两组按下表平行操作。表2 蛋白质标准曲线制作试管编号/mL 0 1 2 3 4 5 6
标准蛋白
溶液/mL 0.02mol/L Tris-HCl缓冲液/mL 考马斯亮兰试剂/mL 摇匀,1h内以0号试管为空白对照,在
595nm
处比色A595nm (2) 各级分蛋白质含量测定考马斯亮兰G-250在酸性溶液时呈茶...
考马斯亮蓝法测
蛋白质
含量数据怎么处理啊?
答:
首先你要用标准浓度的
蛋白
溶液做
标准曲线
,以蛋白浓度为X轴,OD
595
为Y轴,这样就会得到一个线性方程,y=ax+b,R平方要大于0.99,这就是标准曲线 然后同样方法测待测样品的OD595,代入Y,求出X值就是待测样品的蛋白浓度 至于问题很简单啊,以上任何一点,有不会的可以再问我 ...
给出一种酶,如何设计其纯化方案?
答:
表2
蛋白质标准曲线
制作试管编号/mL 0 1 2 3 4 5 6
标准蛋白
溶液/mL 0.02mol/L Tris-HCl缓冲液/mL 考马斯亮兰试剂/mL 摇匀,1h内以0号试管为空白对照,在
595nm
处比色A595nm (2) 各级分蛋白质含量测定考马斯亮兰G-250在酸性溶液时呈茶棕色,最大吸收峰在465nm。当与蛋白质结合后变成深蓝色,最大吸收...
罗丹明b浓度和吸光度
曲线
答:
2、荧光强度与
蛋白质
浓度的正比关系:在一定范围内,罗丹明B与蛋白质结合后产生的荧光强度与蛋白质浓度成正比。这意味着,通过测量荧光强度,可以推算出蛋白质的浓度。3、建立
标准曲线
:为了准确测量蛋白质浓度,需要先建立标准曲线。标准曲线是通过测量一系列已知浓度的罗丹明B标准品与蛋白质混合后的荧光...
如何测定 基
质蛋白
,肌原纤维蛋白,肌浆蛋白的含量
答:
因此在测定时需使用同种
蛋白质
作
标准
。美国fda药典推荐的是Bradford法,蛋白质与染料考马斯亮蓝G-250结合,在一定的线性范围内,反应液
595nm
处吸光度的变化量与反应蛋白量成正比,测定595nm处吸光度的增加即可进行蛋白定量。两者大多数情况下是都能给较为精确的对蛋白质定量。
氟化物分光光度法测定时候,测定管一个小时后有紫黑色沉淀,导致吸光_百 ...
答:
1.
标准曲线
的测定:取12支试管分两组,分别加入0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升的标准
蛋白质
溶液,用水补足到1毫升,然后加入4毫升双缩脲试剂.充分摇匀后,在室温(20~25℃)下放置30分钟,于540
nm
处进行比色测定.用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液.取两组测定的平均值,以蛋白质的含量为横座标,光吸收值...
蛋白质
的检测方法有哪些?
答:
考马斯亮蓝显色法的基本原理是根据
蛋白质
可与考马斯亮蓝G-250 定量结合。当考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合后,其对可见光的最大吸收峰从 465nm 变为
595nm
。在考马斯亮蓝 G-250 过量且浓度恒定的情况下,当溶液中的蛋白质浓度不同时,就会有不同量的考马斯亮蓝 G-250 从吸收峰为 465nm ...
考马斯亮蓝法测
蛋白
浓度,具体步骤有哪些,需要什么试剂?
答:
3.将待测样本溶于100~1缓冲溶液中,该缓冲溶液应与制作
标准曲线
的缓冲溶液相同(最好用PBS)。4.按1:5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液,如出现沉淀,过滤除去。5.每个样本加5ml稀释的染料结合溶液,作用5~30rain。染液与
蛋白质
结合后,将由红色变为蓝色,在
595nm
波长下测定其吸光度。注意,显色反应...
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