考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度存在的误差?

如题所述

1、去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)和0.1N的NaOH会对实验结果有影响

2、标准曲线有轻微的非线性
考马斯亮蓝测定蛋白质浓度是较常用的方法,误差可尽量减到最小,需注意:测定OD值前,将分光光度计提前预热至少30分钟,可保证准确性;配制好的考马斯亮蓝溶液应放于4度保存备用;盐离子不会影响实验结果,但去污剂,如TRITONX-100,SDS等,会严重干扰实验结果。
几种可能1.作标准曲线的时候,标准蛋白样品的浓度不准,或是加入试剂的量有偏差,结果标准曲线的零点吸光度都比你待测的高。2.每种蛋白定量法都有自己的试用范围,如果你的蛋白样品含去垢剂或盐浓度偏高,就会影响结果准确性。3.你的蛋白浓度太低,落到了标准曲线的线性范围之外。
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第1个回答  2019-08-31
1、去污剂、
Triton
X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)和0.1N的NaOH会对实验结果有影响
2、标准曲线有轻微的非线性
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