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蛋白质样品加入考马斯亮蓝染色液后,测得的吸光度不在标准曲线的范围该数据是否可靠？不可靠，如何改进？
如题所述
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推荐答案 2019-11-13
不可靠。如果
吸光度
偏大，就稀释减少样品用量；偏小就多加样品。
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考马斯亮蓝
法测
蛋白质
时为什么浓度越高而
吸光度
越低
答：
吸光值是正的，浓度是负的话，应该和你做的标准曲线有关系，建议重新做下
标准曲线，
r值最起码得有两个9吧。还有就是，你的蛋白浓度肯定比较低，所以你可以把标准品做个浓度比较低的曲线。
考马斯亮蓝
法测定
蛋白质
浓度存在的误差?
答：
几种可能1.作
标准曲线的
时候
，标准蛋白样品的
浓度不准，或是加入试剂的量有偏差，结果标准曲线的零点
吸光度
都比你待测的高。2.每种蛋白定量法都有自己的试用
范围，
如果你的蛋白样品含去垢剂或盐浓度偏高，就会影响结果准确性。3.你的蛋白浓度太低，落到了标准曲线的线性范围之外。
在
考马斯亮蓝
法测定天麻中
蛋白质
含量
的吸光度
为什么要在标曲
范围
内
答：
考马斯亮蓝
法应尽量使用与待
测样本
性质相近的
蛋白质
作为标准品，例如测定抗体，可用纯化的抗体作为标准。如果待测样本是未知的，也可用抗体作为
标准蛋白
。通常在20ug到150ug/100ul之间绘制
标准曲线
。一般情况，当溶液中的蛋白质浓度增加时，显色液在595nm处
的吸光度
基本能保持线性增加，因此可以用考马斯...
考马斯亮蓝测蛋白
浓度为什么出现负值
答：
几种可能 1.作
标准曲线的
时候
，标准蛋白样品的
浓度不准，或是加入试剂的量有偏差，结果标准曲线的零点
吸光度
都比你待测的高。2.每种蛋白定量法都有自己的试用
范围，
如果你的蛋白样品含去垢剂或盐浓度偏高，就会影响结果准确性。3.你的蛋白浓度太低，落到了标准曲线的线性范围之外。
用
考马斯亮蓝
G-250法测定
蛋白质的
含量时,应注意哪些问题?
答：
蛋白质
所测的OD值一定要位于
标准曲线范围
内，因为G-250的曲线随着蛋白浓度增高有些略微偏离线性，若蛋白质浓度太高，可适当稀释后再测。此外，用于
标准样品的
牛血清白蛋白组分V最好现配现用，已经配好的溶液即使是-20度保存一段时间后也会造成你的结果偏高。
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