考马斯亮蓝发测蛋白质含量时蛋白质变性后跟考马斯亮蓝反应有影响吗?

考马斯亮蓝发测蛋白质含量时蛋白质变性后跟考马斯亮蓝反应有影响吗?

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推荐答案 2013-09-24

考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，最大光吸收在465nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比。
若是变形后还能搅为均匀的分散在溶液中，影响相对较小

若是沉淀在光度计下不易透射，影响较大追问

我要测细菌蛋白，细菌吸附在矿石上，准备把矿石烘干后称一定质量用氢氧化钠溶液消化后测蛋白质含量，想知道烘干会不会有影响，不知道考马斯亮蓝显色机理，怕高温对蛋白有什么影响进而影响染色和含量测定

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考马斯亮蓝测蛋白答：会的。不仅碱性氨基酸，去垢剂,如SDS，还有高浓度的缓冲液都会有影响。而且由于蛋白质酸性，碱性氨基酸含量不同，即使蛋白质浓度相同，所测出的值也会不同。

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