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595nm蛋白质吸光度标准曲线
考马斯亮蓝法测定
蛋白质标准曲线
答:
722S型分光
光度
计使用及原理,移液管使用 三、
标准曲线
制作:1.以A
595nm
为纵坐标,
标准蛋白
含量为横坐标(六个点为10ug、20ug、40ug、50ug、60ug),在坐标轴上绘制标准曲线。2.利用标准曲线查出回归方程。3.用公式计算回归方程。4.或用origin作图,测出回归线性方程。即A595m-aXX()+6一般相关系数...
考马斯亮蓝法测
蛋白质
含量
答:
考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与
蛋白质
结合,使染料的最大吸收峰(lmax)的位置,由465nm变为
595nm
,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。2、步骤 制作
标准曲线
取7支试管,按下表平行操作。试管编号 0 1 2 3 4 5 6
标准蛋白
溶液(mL)...
急!怎样用
标准曲线
测
蛋白质
浓度? 给一个A
595nm
的标准曲线 怎样求蛋白质...
答:
标准曲线一般都是有这样的关系式:y=aX+b或者是y=aX-b
,只要你将测得是x代进去就可以了.或者有另外一个方法定量法,A表/C表=A样/C测,A为吸光度,求C测只要你将数据代进去就可以了!如果还不清楚的话,请将数据上传
考马斯亮兰测定
蛋白质
的方法步骤
答:
取血清0.25ml直接置于50ml容量瓶中,加生理盐水至刻度,摇匀。(此法样品稀释200倍)。取试管二只,按下表操作:摇匀,静置3分钟,在721型分光
光度
计亡波长
595nm
比色,读取光密度,查
标准曲线
,求得稀释样品
蛋白质
浓度。【计算】未知样品蛋白质浓度μg/ml=稀释样品浓度×稀释倍数 【优缺点】(—)操作...
考马斯亮蓝G-250法测定
蛋白质
含量的原理是什么?
答:
最好用PBS)。4.按1:5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液,如出现沉淀,过滤除去。5.每个样本加5ml稀释的染料结合溶液,作用5~30min。染液与
蛋白质
结合后,将由红色变为蓝色,在
595nm
波长下测定其
吸光度
。注意,显色反应不得超过30min.6.根据
标准曲线
计算待测样本的浓度。
bradford法
答:
是的,先用OD和
蛋白质
浓度在EXCEL做
标准曲线
。OD值为X轴,蛋白质浓度为Y,生成曲线,从曲线里得出方程。然后将未知蛋白的OD值代入方程,就能求出未知蛋白的蛋白质浓度。测的吸光值不要太大和太小。否则误差太大。
蛋白质
含量测定的方法
答:
3.将待测样本溶于100~1缓冲溶液中,该缓冲溶液应与制作
标准曲线
的缓冲溶液相同(最好用pbs)。4.按1:5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液,如出现沉淀,过滤除去。5.每个样本加5ml稀释的染料结合溶液,作用5~30rain。染液与
蛋白质
结合后,将由红色变为蓝色,在
595nm
波长下测定其
吸光度
。注意,显色反应...
(Bradford法)如何测定
蛋白
浓度?
答:
以A
595nm
为纵坐标,
标准蛋白
含量为横坐标(六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug),在坐标轴上绘制
标准曲线
.4、样品中
蛋白质
含量的测定 另取两支干净的试管(做一重复),加入合适浓度的待测样品,使其测定值在标准曲线的范围内,测定方法同上,由样品液的
吸光度
查标准曲线即可求出...
bradford法测定
蛋白质
含量的原理是什么?应如何克服不利因素对测定的影响...
答:
bradford法测定
蛋白质
含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色,用分光光度计在
吸光度595nm
处读数,通过
标准蛋白
与G250结合显色建立
标准曲线
,再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。不利因素主要是特殊蛋白的结构,缓冲液组分中有干扰试剂等。双缩脲法和Folin—酚试剂法...
如何准确测定样品中
蛋白质
的含量
答:
在
595nm
下测定的
吸光度
值a595,与蛋白质浓度成正比。 2、试剂与器材 (1)试剂: a、
标准蛋白质
溶液,用球蛋白或牛血清清蛋白,配制成1.0mg/ml和0.1mg/ml的标准蛋白质溶液。 b、考马斯亮兰g—250染料试剂:称100mg考马斯亮兰g—250,溶于50ml 95%的乙醇后,再加入120ml 85%的磷酸,用水稀释至1升。 (2...
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