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跑完电泳的胶能过会儿再做银染吗
在做核酸的聚丙烯酰胺凝
胶电泳
后,
银染
的步骤是什么啊?
答:
(硝酸银)
银染
步骤:(1)取下凝胶放入染色盒中用蒸馏水冲洗2次;(2)固定:将
胶
放于固定液中振荡,固定10min;(3)氧化:倒出固定液,水洗后用1%硝酸氧化3min,用蒸馏水漂洗2次,每次2s;(4)染色:放入银染液中避光染色30min;(5)洗涤:蒸馏水漂洗15s;(6)显色:放入显色液中显色;...
DNA聚丙烯酰胺凝
胶电泳
完后在电泳槽放一晚上再染色行吗
答:
与蛋白的不是很一样,不需要加sds 染色方法主要是
银染
,但是过程不同
银离子光染是真的吗
答:
真的。
银染
实验中,在碱性条件下,银离子被还原成金属银,沉淀在蛋白质的表面上显色。蛋白
电泳
后的SDS-聚丙烯酰胺凝胶在甲醇溶液中浸泡后,水洗后用硝酸银溶液银染,再水洗后用碳酸钠甲醇水溶液显色。银离子是银原子失去一个或一个以上电子形成的带正电荷的阳离子,如Ag、Ag等。
DNA测序技术的操作
答:
银染
不如放射性检测法灵敏,而需要更多的模板量,此外,也不
可能通过
延长X-光胶片曝光时间的方法增加信号强度。因此,请使用推荐的DNA模板量, 每次均使用所提供的对照检查系统的可靠性,并且注意如下几点:(1) DNA的浓度和纯度必须经过琼脂糖凝
胶电泳
或荧光法测定, 样品应与已知量DNA一起电泳。(2) 分光光度法对于很多...
琼脂糖凝
胶电泳能
用
银染
法吗
答:
不能
,银染法蛋白或DNA在SDS-PAGE电泳时用。
跑的聚丙烯酰胺凝
胶电泳
胶片在
银染
显色后为什么非常黑呢。
答:
你是不是用的自来水冲洗了,自来水中的Cl-离子与AgNO3溶液反应形成了AgCl沉淀,氧化后变黑。所以所有的漂洗最好用去离子水,或者纯净水
为什么
电泳
后要转膜? 直接染色或荧光标记检测不
可以吗
?
答:
抗体需要孵育 直接在
胶
上的话蛋白早就扩散没了 而且胶各种不方便 容易破碎啥的 当然转到膜上方便啊
急求:有谁知道蛋白质
电泳
染色时
的银染
配方呀?谢谢你的帮助
答:
4.
银染
:20min 0.625g AgNO3 加水到终体积250ml 5.水洗: 2 x 1 min (准确掌握时间,水洗时间长显色速度慢,点的颜色浅)6.显色:视情况而定 6.25 g Na2CO3 100 ul 37% 甲醛 (在使用前加入)可加入 1g/L Na2S2O3 50微升以降低背景(在使用前加入)加水到终体积250ml Sweet silver:...
PAGE的原理是什么?
答:
电泳
条件 : 100V恒压约20min,指示剂进入浓缩胶;改换160V恒压,当指示剂移动到胶板底部时,停止电泳,整个过程约80min。 染色和脱色:取出胶板于0.25%考马斯亮蓝染色液中染色约30min,倾出染色液,加入考马斯亮蓝脱色液,缓慢摇动,注意更换脱色液,直至胶板干净清晰背景。也可以用
银染
或者活性染色。分离碱性蛋白 要用低...
请教TGGE
银染
步骤
答:
我个人的染色方法,仅供参考:
银染
:将凝胶于水中取下,蒸馏水洗2次;加入新配制的0.1%硝酸银溶液及旧的硝酸银溶液各250ml,摇床摇30min至溴酚蓝带颜色褪淡。蒸馏水洗一次。显色:加入约500ml显色液(15g氢氧化钠+0.19g四硼酸钠,加水至1000ml),并加入甲醛1.5~1.8ml,摇床上轻摇,约5min...
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