急求：有谁知道蛋白质电泳染色时的银染配方呀？谢谢你的帮助

Question

有谁知道蛋白质电泳的银染配方和步骤吗？谢谢你了
要是自己配的话应该怎么配呀？需要哪些药品呀？谢谢你的回答

Answer 1

我的配方如下，仅供参考：
1. 固定：30min或过夜
100ml 乙醇 40% 乙醇
25ml冰醋酸 10% 冰醋酸
加水到250ml
2. 致敏：30min
300ml 乙醇 30% 乙醇
68g 乙酸钠（或112.8g 三水乙酸钠）
2g硫代硫酸钠
加水到终体积1000ml
3. 水洗：3 x 5min
4. 银染：20min
0.625g AgNO3
加水到终体积250ml
5. 水洗： 2 x 1 min (准确掌握时间，水洗时间长显色速度慢，点的颜色浅)
6. 显色：视情况而定
6.25 g Na2CO3
100 ul 37% 甲醛 （在使用前加入）
可加入 1g/L Na2S2O3 50微升以降低背景（在使用前加入）
加水到终体积250ml

Sweet silver:
硼酸 3.1克 100 mM
NaOH 3 克 150 mM
加水到终体积500 ml。
用前取sweet 225 ml加1g/L Na2S2O3 200微升，40%葡萄糖25 ml。
7. 终止：10min
7.3g EDTA.Na2.2H2O 或者2g 甘氨酸
加水到终体积500ml
8. 保存：1% 冰醋酸，4 ℃

Answer 2

上海生工有现成的产品 编号为BSP021 BSP027 BSP029S-N
任你选择。

Answer 3

银氨染色法：
1、取二块双向蛋白凝胶，用500mL固定液（40%甲醇+10%乙酸）固定30min

2、用双蒸水冲洗3次，时间分别为3min、5min和3min

3、然后用500mL AgNO3染色液（500mL 中含有3.6% NaOH 10.5mL、20% AgNO3 9 mL和5mL氨水）染色32-33min

4、用双蒸水冲洗4次，时间分别为3min、4min、4min和1min

5、然后用500mL显色液（500mL中含有1%柠檬酸2.5mL和甲醛250μL）显色5-12min（显色时应摇动，显色时间可灵活，一般采用边显色边观察）

6、500mL 5%醋酸终止反应5min，然后用ddH2O冲洗2-3次

注意：双向银染上样蛋白总量为40-250μg。

Answer 4

分子克隆实验指南里面有 我用过。不过自己配置肯定不如买现成的产品好用