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tricine胶跑电泳怎么样跑的好些
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第1个回答 2014-12-03
因为tricine胶采用三层不连续胶的结构由致密胶+夹层胶+浓缩胶构成。灌胶前,各种丙烯酰胺溶液分别加入10μl的过硫酸氨和1μl的TEMED,随即灌胶,先灌下层的致密胶再覆盖以中间的夹层胶,然后铺浓缩胶静置以聚合形成三明治式的不连续梯度凝胶。
内槽加入负极电泳缓冲液,外槽加入正极电泳缓冲液,形成Trcine-SDS-PAGE电泳系统用20mA恒流电泳3h。
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为什么跑小蛋白时要用
tricine胶
答:
如果
胶
浓度不同,蛋白在其中迁移的速率就不一样,所以如果采用裁膜的方式,对于蛋白迁移的位置要事先有个预判。10%的胶,浓度高,迁移慢一些,如果都在相同位置裁,这里看到条带,6,8%的胶,膜需要裁得更靠下缘。或者把之前裁掉的膜的下半部分再拿来做做实验试试。当然,
电泳
时的各种因素也会有...
已知我的蛋白质分子量很小,差不多在5KD以下,该
怎样跑电泳
啊?
答:
不用配非常高浓度的胶
。你可以做Tricine-PAGE,对于分离小肽非常有效。
胶
制完后可以当天
电泳
吗
答:
可以。胶制完后可以当天
电泳
,如PAGE胶制作好以后电泳时,一般先80V左右浓缩,至样品压成一条直线后调大电压至120V,一般需要再跑40-60min左右才能跑完。 不同浓度的
胶跑的
时间可能略有差异。 如果是采用的
Tricine
系统,则可能要跑3h左右,同时需要冰浴。电泳(electrophoresis, EP)是电泳现象的简称...
求助SDS-Page
电泳
,marker 中25kDa 以下的条带全跑不开
答:
SDS-Page
电泳
,marker 中25kDa 以下的条带全跑不开表明胶浓度不合适 一般方法就是提高
胶
浓度至少到15 如果还是分离效果不好,就使用
Tricine
SDSA PAGE 这样25kDa以下的条带能跑开了
tricine
蛋白
电泳
染色后
怎么
没有条带
答:
- 浓缩
胶
配方:1毫升含0.4%SDS的3M Tris-HCl,pH 8.4。- 浓缩胶其他成分:50.5毫升甲叉/双甲叉(29:1),4毫升40% AP,16毫升TEMED。- 分离胶配方:2.4毫升聚乙二醇,2毫升含0.4% SDS的3M Tris-HCl,pH 8.4,3.6毫升甲耐型叉/双甲叉(19:1),4毫升40% AP,16毫升TEMED。2...
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两块胶怎么一起跑电泳
跑电泳不跑浓缩胶
电泳上样溢出来了可以跑胶
琼脂糖凝胶电泳跑胶
跑完电泳的胶能过会儿再做银染吗
pcr电泳跑胶步骤
电泳跑胶
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