sds-page不连续系统中,为什么浓缩胶对蛋白质有浓缩效应

如题所述

首先得说一下导电性与溶液中粒子的总电荷数和浓度有关,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9,电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统,在PH6.7下,HCL的主要离子是CL-,而H+微乎其微。在电场下离子会移动,导致电荷分布不均匀,由于CL-浓度大,所以在电场中移动得快,而甘氨酸由于主要呈现两性离子(也就是甘氨酸氨基带正点,羧基带负点)的状态,总电荷之和接近0,在电场中移动很慢,所以这样导致CL-游的快,而甘氨酸游的慢,蛋白质分子在它们之间很尴尬的局面,由于后面有甘氨酸垫底,所以他们都还有希望,但是CL-跑的老远,所以是既有希望压力也是大大的(电荷的移动就是为了平衡使得电压变小,就是由于这种电荷极度分布不均导致CL-和甘氨酸之间电压很高,但是由于它们一个太快一个太慢导致之间的电荷少,所以导电性不高),于是蛋白质在它们之间移动的动力很大(电压高),但是阻力也大(电荷量少),就好比你把百米赛跑的视频左右压缩成1厘米的程度,这样就导致它们慢慢的被压到一起。

就拿赛跑举例子,在浓缩胶处,蛋白质看到前面一大群兔子在前面领先了老远,而后面的乌龟爬的慢死,这个时候有压力,蛋白质说:“兔子(CL-)也敢狂,我们疯狂的蛋白质还跑不过它们?兄弟们走起”蛋白一群就奋勇直追,可是蛋白质只能看到兔子跑起来扬起的灰,心中希望却感觉现实残酷理想不可及,却不怎么能跑的很快,蛋白质虽然疯狂却一直是一群没有分散。后来到分离胶处时,由于PH=8.9,此时乌龟(甘氨酸)变身成为忍者龟,一下子就跑到疯狂蛋白质前面去了,结果这个时候的蛋白质由于体质体型差异,而且垫底了,心里承受不了,有些就玩不了了,渐渐自心下慢了,而有些还是斗志昂扬,依旧追赶,于是蛋白质兄弟们就分开啦!

真的是想的头疼,当初也被这个问题难住,今天感觉好像懂了点,就举了一个这样的例子!

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