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考马斯亮蓝测蛋白质
怎样配制
考马斯亮蓝
G250
蛋白
染色剂
答:
考马斯亮蓝
G-250的配制:1.称取100 mg考马斯亮蓝G-250,溶于50 mL 90%乙醇中,2.加入85%的磷酸100 mL,3.最后用蒸馏水定容到1 000 mL。此溶液在常温下可放置一个月。
考马斯亮蓝
法
测定蛋白质
中,样品含有蔗糖和甘油怎么排除
答:
标准曲线
蛋白质
样本的准备:尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品,例如
测定
抗体,可用纯化的抗体作为标准。如果待测样本是未知的,也可用抗体作为标准蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之间绘制标准曲线。染色 蛋白质与
考马斯亮蓝
G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在...
考马斯亮蓝
R250和G250在用途上的区别有哪些?
答:
考马斯亮蓝
R250 和G250在用途的区别:1、考马斯亮蓝R250是通过范德瓦尔键与
蛋白质
结合,染色灵敏度比氨基黑高5倍,适用于SDS电泳微量蛋白质染色。2、考马斯亮蓝G250在三氯乙酸中不溶而成胶体,能选择地染色蛋白而几乎无本底色,所以常用于需要重复性好和稳定的染色,适于作定量分析。考马斯亮蓝R250 ...
考马斯亮蓝
法
测蛋白质
含量是多少?
答:
考马斯亮蓝
法
测蛋白质
含量需要根据实际样本来确定,无法一概而论。考马斯亮蓝法测也称考马斯蓝染色法(coomassie blue staining)又称Bradford法,是 Bradford 于 1976 年建立起来的一种蛋白质浓度的测定方法。由于其突出的优点,正得到越来越广泛的应用。相关信息:考马斯亮蓝G-250
测定蛋白质
含量属于...
用
考马斯亮蓝测蛋白质
含量为什么比凯式定氮法的含量低?
答:
凯氏定氮是用
蛋白质
含氮量约为16%的经验通过
测定
氨含量推算蛋白质含量的,故可能因为样品中含有含氮物质导致结果偏高。而
考马斯亮蓝
是直接与蛋白质反应产生蓝色,故结果较为准确。
考马斯亮蓝
法
测定蛋白质
浓度存在的误差?
答:
是的,
考马斯亮蓝测定蛋白质
浓度的方法是选用已知浓度的蛋白进行梯度稀释后,测定OD595,而实际上考马斯亮蓝和蛋白质的结合程度与蛋白质分子上的碱性集团数量有关,因此不同的蛋白质和考马斯亮蓝的结合能力还是有一定差异的,测定蛋白质浓度最好的方法是Lowry法 ...
考马斯亮蓝
法
测蛋白质
含量偏高的原因
答:
1. 血浆样本放置时间太久,
蛋白质
变性;2. 实验比色杯由于 使用后未及时擦洗,导致比色误差(原因小);3. 人为操作 不当,导致误差
考马斯亮蓝
比色检测牛奶类乳状液食品中
蛋白质
的含量应该如如何进行前处...
答:
考马斯亮蓝
法是最常用的生化试剂
测蛋白
含量的方法里比较不受干扰的一种。但是,有少数的化学药品(尤其是一些去污剂和两性电解质),其空白试剂或与蛋白染料反应后它们的吸光度可能会有显著改变,如SDS、EDTA、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸盐、(NH4)2SO4等,这些物质可以用凝胶过滤,透析,或磷酸钙沉淀...
与其它方法相比,
考马斯亮蓝测定蛋白质
含量的优点
答:
突出优点是:(1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低
蛋白质
检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。(2)
测定
快速、简便,只需加一种试剂。完成一个样品的测定,只需要5分钟...
考马斯亮蓝
法
测定蛋白质
含量实验中,使用的水一定是蒸馏水吗?为什么...
答:
考马斯亮蓝
法
测定蛋白质
含量实验中,使用的水最低要求是蒸馏水,更高精度要求可能会使用双蒸水。因为Bradford检测中要用的试剂配制,标准曲线的制作都要用到水。如果不是使用蒸馏水,可能水里面会有一些游离的离子或者电解质,会影响试剂配制的准确性,干扰实验结果。而水中残留的有机物等可能会和考马斯...
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