荧光定量PCR的引物怎么设计

如题所述

推荐答案 2018-06-27

1、查找该物种或近缘物种信息，看是否能确定内含子序列的位置，在CDS上设计跨内含子的引物，以避免基因组污染；
2、扩增片段大小最好在200bp左右，太大会影响扩增效率；
3、最好一次分别设计两条上游（距离较近）和下游引物（距离较近），组合成4个扩增片段；
4、用任何方法或软件设计好的引用都要用少量cDNA样本来验证引物扩增效果：主要是有无二聚体？有无非特异性扩增？
5、筛选出一对最满意的引物上机，祝你实验顺利。

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第1个回答 2014-12-13

按照实验规则设计

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