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western blot点样后跑出的条带浓缩胶跑的条带是歪的
如题所述
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推荐答案 2014-11-11
是SDS-PAGE那步的时候吗?
可能是浓缩胶凝固时间不够,如果是分离胶可能是没有水封一段时间
另外样品中如果含有高盐可能也会跑歪
温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考
当前网址:
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实际工作中,
western blot
电泳
条带
总
是歪
斜不整齐原因?
答:
胶没有配好~可能是成分不对比
如pH~也可能是凝的时间不充分~浓缩胶的距离要充分~可以在样品两端加loading压道~
western blot
转膜
后条带
不直是什么原因?
答:
你确定不是跑胶的时候就是弯曲的?
建议下次同时跑两块胶,一块转膜,一块考染看看
。如果是跑的就是弯曲的,要考虑胶是否均匀,以及拔梳子时是否导致浓缩胶与分离胶平面发生移动等情况。如果确定是转膜时导致的条带弯曲,转膜时电压或电流没控制好,局部温度过高或离子强度不均匀导致条带弯曲,不过这种情...
求助,
Western-Blot
转膜不成功
答:
你确定不是跑胶的时候就是弯曲的?
建议下次同时跑两块胶,一块转膜,一块考染看看
。如果是跑的就是弯曲的,要考虑胶是否均匀,以及拔梳子时是否导致浓缩胶与分离胶平面发生移动等情况。 如果确定是转膜时导致的条带弯曲,转膜时电压或电流没控制...
Western Blot
结果
条带
全面分析,总有一款适合你
答:
条带位置低、模糊,可能是样品保存问题
。- 条带相连:上样过量或样品扩散,控制</: 适量上样,避免样品弥散。电泳过程的疑难解答</:- 形状异常的条带:凝胶冷却不均或槽子老化,应对</: 优化冷却步骤并定期更换槽子。- 其他问题,如溶解、颗粒或浓缩胶问题,解决</: 严格控制实验条件和试剂质量。
SDS-PAGE蛋白质电泳问题
答:
至于加样散,原因就可能是胶质不均了。对于结果应该影响不大。电泳时
条带歪
了,说明分离胶不匀,最前面的溴酚蓝如果不在一条线上,就是这个问题,对于最终结果有影响,建议重做。当然,在灌注
浓缩胶
前,你可能使用30%酒精封闭过,酒精除不干净,或者滤纸吸干酒精碰触了胶面,都会有影响,前者会让蛋白...
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