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western blot 原理
westernblot
的
原理
及操作步骤,应用有哪些
答:
原理
Western
Blot
与Southern印迹杂交或Northern印迹杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗.经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素膜NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生...
什么是
western
blot
?有什么用途?
答:
【答案】:Western
blot依据的基本原理有两个:蛋白质的凝胶电泳分离和抗原一抗体间的特异结合
。
Western blot就是蛋白质免疫印迹
。将经过凝胶电泳分离的蛋白质条带,原位电转移至能吸附蛋白质且有一定机械性能的薄膜(如醋酸纤维素膜)上,然后分别与目标蛋白质的特异抗体以及酶标二抗进行孵育结合,最好加入酶...
westernblot
的
原理
及操作步骤,应用有哪些
答:
原理 Western Blot与Southern印迹杂交或Northern杂交方法类似,
但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体
,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素膜NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其...
westernblot原理
及过程
答:
westernblot原理及过程如下:
Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品
,转移到固相载体上,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经...
Western
blot
实验技术及常见问题分析?
答:
Western
blot基本原理:在电场的作用下将电泳分离的多肽从SDS-PAGE凝胶转移至一种固相支持体,然后用这种多肽的特异抗体来检测
。Western blot应用: 目的蛋白的表达特性分析;目的蛋白与其他蛋白的互作;目的蛋白的组织定位;目的蛋白的表达量分析; Western blot一般流程:蛋白样品的制备:1水溶液提取法:稀盐和缓冲系统的水溶液...
western
blot
的工作
原理
答:
1、
Western
Blot
法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品,转移到固相载体上,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。2、以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自...
western
blot
的工作
原理
答:
PAGE能有效的分离蛋白质,主要依据其分子量和电荷的差异,而SDS-PAGE(SDS变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳)的分离
原理
则仅根据蛋白质的分子量的差异,因为SDS-PAGE的样品处理液是在要跑电泳的样品中假如含有SDS和巯基乙醇(2-ME)或二巯基赤藓醇(DTT),其可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级...
westen
blot原理
答:
Western
Blot
即蛋白质印迹法(免疫印迹试验),是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。它是将电泳分离后的细胞或组织中蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病...
western
blotting
的
原理
、操作步骤及意义
答:
western
blot
中转移在膜上的蛋白处于变性状态,空间结构改变,因此那些识别空间表位的抗体不能用于western blot检测。这种情况可以将表达目的蛋白的细胞或细胞裂解液中的所有蛋白先生物素化,再用酶标记亲和素进行western blot。实验中取胶和膜需带手套。
Western
可以参考如下步骤进行操作。 1.收集蛋白样品(Protein sampl...
western
blot原理
是什么?
答:
Western
blot
的
原理
:简单来说原理就是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。Western blot,中文为蛋白质免疫印迹试验,简单来说是抗原抗体特异性结合。Western blot结果中背景较高的原因及建议:膜...
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