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荧光定量pcr引物
作实时
荧光定量PCR
,想把两种
引物
,探针混在一起反应,引物,可以事先混合...
答:
可以事先混合,混合液作为实时
荧光
用的最好还是现配现用,毕竟这是一个反应比较灵敏的实验。
实时
荧光定量 PCR
答:
实时
荧光定量 PCR
,简称 RT-QPCR, 属于 Q-PCR 的一种,目前该技术已得到广泛应用,如:扩增特异性分析、基因定量分析、基因分型、 SNP 分析等。荧光定量 PCR 常用的方法是 DNA 结合染料 SYBR GreenⅠ的非特异性方法。 SYBR Green I 是一种结合于所有 dsDNA 双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的荧光染料, 可与所...
实时
荧光定量PCR
的结果该怎样分析?
答:
1、如果有标准曲线,按照标准曲线计算;2、一般都是相对量,则用deltadeltaCT方法来计算;3、
引物
或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性;4、模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起;5、看CT值是分析
荧光定量PCR
最直观的一个数据,CT值一般在35左右就失去参考价值了,平时我们...
什么是实时
荧光定量PCR
,检测指标是什么?
答:
检测指标是:各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime
PCR
反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳,GoldView染色,检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。原理:PCR扩增时在加入一对
引物
的同时加入一个特异性的
荧光
探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针...
荧光定量pcr
(基本原理和应用领域介绍)
答:
荧光定量PCR
(qPCR)是一种广泛应用于生命科学研究和医学诊断的分子生物学技术。它结合了PCR技术和荧光检测技术,能够快速、准确地检测出目标DNA或RNA分子的数量,因此在病原体检测、基因表达分析、遗传疾病诊断等领域得到了广泛应用。基本原理 qPCR技术基于PCR技术,但是在PCR的基础上加入了荧光染料和检测系统...
荧光
定
PCR
中的注意事项
答:
4. 反转录 反转录所得cDNA的量必须精确地等于相应的mRNA的量,反转录对于实时
定量PCR
来说是非常关键的一步。目前常用的反转录酶有2种:AMV-RT和MMLV-R。反转录常用的
引物
有随机引物、Oligo-dT和特异引物。相比之下Oligo-dT和特异性引物更适合实时定量PCR。5.利用实时定量PCR研究基因表达时,一般用...
荧光定量pcr
与FPKM值有什么差别?
答:
深入解析:
荧光定量PCR
与FPKM值的差异与联系荧光定量PCR(qPCR)和FPKM值,作为基因表达量测量的两种重要工具,它们在揭示基因表达水平时各有独特的原理和应用场景。首先,让我们来看看FPKM的内涵。FPKM,全称为 Fragments Per Kilobase of transcript per Million mapped reads,是RNA-Seq技术中衡量基因表达...
荧光定量pcr
结果出现的峰有很多个,不止一个,而且内参的峰也是很多个,内...
答:
溶解曲线不止一个主峰1、
引物
设计不佳:避免二聚体和发夹结构的出现;2、引物浓度不佳:适当调整引物浓度;3、退火温度低:提高退火温度;4、镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度;5、模板中有基因组的污染:通过引物设计避免非特异扩增。
相同
引物荧光定量PCR
与普通PCR扩增出来的片段大小是否相同
答:
你普通的RT-PCR模板跟
荧光定量PCR
的模板一样吗?用同一
引物
扩增cDNA和genomic DNA出来的片段长度有可能会不一样
rtpcr和实时
荧光定量pcr
区别是什么?
答:
rtpcr和实时
荧光定量pcr
区别如下:1、所说的PCR应该就是最常规的PCR,以DNA为模板,通过上下游
引物
,实现DNA的扩增。2、RT-PCR一般情况下是指反转录PCR(reverse transcription),尽管有些资料上说实时
荧光定量PCR
也(realtime fluores-cence quantitative PCR)也简称RT-PCR,但是这是不对的,不推荐。...
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