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western结果如何分析
Western
Blot为什么必须要用内参
答:
可是由于经费限制或者偷懒的原因,国内的不少人做
Western
Blot往往省略参照,导致结果出现问题时无法
分析结果
――即便有结果也可能影响结果的分析。内参是最容易被忽略的一项。我们知道,要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中,目的蛋白表达量的相对多少,前提条件是等量的细胞上样,才有比较的基础...
小弟刚开始做
Western
Blot,显影总是没
结果
答:
给的信息稍微有点少。看你的情况,应该是有东西做出来了,但是曝光以后没动静了。要检测的目标蛋白丰度高吗?用的底物的灵敏度大约什么级别?二抗浓度用的是底物推荐的浓度吗?因为有时候如果二抗浓度太高了,加入底物很短时间内底物就消耗完了,等到真正去曝光压片的时候就没有信号了。如果蛋白丰度挺好...
Western
Blot为什么必须要用内参
答:
Western
Blot 实验设计中要求有 良好的参照体系,对实验
结果分析
是非常有用。特别是当实验出现问题时,借助参照体系很容易就 可以查出问题所在,而不必抓耳挠腮怨天尤人。良好的参照体系通常包括 分子量 Marker (用来确定 蛋白条带对应的分子量大小),空白载体对照(如果是诱导表达体系还应该有诱导前的...
Western
Blot为什么必须要用内参
答:
可是由于经费限制或者偷懒的原因,国内的不少人做
Western
Blot往往省略参照,导致结果出现问题时无法
分析结果
――即便有结果也可能影响结果的分析。内参是最容易被忽略的一项。我们知道,要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中,目的蛋白表达量的相对多少,前提条件是等量的细胞上样,才有比较的基础...
western
-blot信号趋势不一致 前提条件一样 蛋白量等都一样,就是曝光...
答:
同一批样品?还是不同批次的样品?如果是同一批样品,则可能是转膜时没贴紧导致电流分配不均或显色过程中显色液加得不均匀造成的。如果不是同一批样品就没什么比较性了。
western
blotting 的过程和原理
答:
Western
Blot原理、显色分类及操作步骤一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物...
western
blot 样品有沉淀影响
结果
吗?怎末处理?
答:
western
的样品不就是SDS-PAGE的样品吗?加上SDS-loading buffer 煮一下,离心就好啊~~~不知道你是不是这个问题。最好详细描述一下。
吐温80实验
结果
不明显
答:
【摘要】目的:探讨吐温80与41℃温热联合处理对BGC-823胃癌细胞热耐受性和Hsp70表达的影响。方法:采用吐温80处理后的BGC-823细胞,在41℃温热作用后,于不同时间点进行43℃再次处理。通过细胞生长曲线、克隆形成率
分析
,以及免疫组化和
Western
印迹法评估Hsp70的表达水平。
结果
:(1)41℃温热处理可诱导BGC...
western
blot电泳后,为什么要考马斯亮蓝染色,直接转膜不行吗?谢谢!_百 ...
答:
WB的胶用考马斯亮蓝染色,有为了确定你的目的条带电泳情况目的,还有一个目的,就是跟用丽春红染摸一样的作用,看转膜的效率。也就是看你的目的条带是否都转移到你的膜上了。这步染色完全可以省略,一般都可以用预染Marker来进行转膜观察,另外考马斯亮蓝与蛋白结合后,很难再去除。
western
blot等生物学试验中的内参是什么意思
答:
内参就是标准品,是对照。WB或者RNA实验想要简单的看一下相对定量
结果
,没有内参就没有测量标准,将内参固定一个浓度后样品的浓度就可以参照内参来相对定量一下。
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