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western结果如何分析
外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测的
结果如何分析
答:
SDS-PAGE电泳后,观察空质粒和外源基因的重组质粒在大肠杆菌中诱导表达后产生的蛋白带的差异,然后可以转膜后用外源基因所编码蛋白的单克隆抗体做
Western
-blot鉴定即可。
求做
western
blot时提取贴壁细胞总蛋白详细的protocol
答:
我个人经验,也以六孔板为例:1、移除旧培养液 2、每孔加PBS1ml,漂洗1到2次 3、每孔加蛋白裂解液100ul(蛋白裂解液不易加多,多了会稀释蛋白浓度)4、然后用细胞刮棒来回刮除细胞,用枪头吸出液体至干净的EP管(操作最好在冰上,尽量吸干净)5、短暂振荡一下,置冰静置15到30分钟 6、离心...
Western
blot analysis是什么意思
答:
diagnosis of multiple sclerosis as defined by aninternational panel ( the mcdonald criteria).使用蛋白印迹
分析
法测定抗体作为基线,将
结果
与患者进展到临床上确诊多发性硬化,或者根据国际诊断标准(mcdonald标准)确诊为多发性硬化的时间和速度作比较。.很高兴为你解答!如有不懂,请追问。 谢谢!
western
blot等生物学试验中的内参是什么意思
答:
内参就是标准品,是对照。WB或者RNA实验想要简单的看一下相对定量
结果
,没有内参就没有测量标准,将内参固定一个浓度后样品的浓度就可以参照内参来相对定量一下。
western结果怎么
做成柱形图
答:
用ImageJ或者别的什么图像处理软件计算每个条带的灰度或者白度,有的曝光软件自己就带这个功能,以此来半定量蛋白的表达水平,然后相互之间做比较
吐温80实验
结果
不明显
答:
【摘要】目的:探讨吐温80与41℃温热联合处理对BGC-823胃癌细胞热耐受性和Hsp70表达的影响。方法:采用吐温80处理后的BGC-823细胞,在41℃温热作用后,于不同时间点进行43℃再次处理。通过细胞生长曲线、克隆形成率
分析
,以及免疫组化和
Western
印迹法评估Hsp70的表达水平。
结果
:(1)41℃温热处理可诱导BGC...
凝胶酶谱和
western
blot的区别?
答:
条带的强弱与MMP-2 和MMP-9 活性成正比。 复性原理:在电泳过程中,SDS 与样品中的MMPs 结合(当然是可逆性结合),破坏其氢键、疏水键而使MMPs 不能发挥其分解明胶的作用,而只有当将胶置 Trition 中洗脱(最好是放在摇床上摇,30min/次,做2 次或15min/次,4 次。而
western
blot采用的是...
转染后
Western
不出
结果
可能会有什么原因?
答:
转染后
Western
检测不到高表达量的目的蛋白有很多原因 首先就是抗体是否合适需检测的目的蛋白,可以考虑更换其他抗体 然后转染可以是瞬时转染,也可以是稳定细胞株转染 假如是瞬时转染检测不到,可能就是抗体或者Western操作的问题 假如是稳定细。
Western
Blot前煮蛋白对
结果
真的没影响吗
答:
煮蛋白是为了让蛋白完全变性~失去空间结构变为线性~使跑胶速度的决定因素变为蛋白分子量大小~
为什么RT-PCR
结果
与
western
blot不同
答:
重复3次。基因水平和蛋白水平的表达不一定是对应的,有可能基因表达很高,但是蛋白水平痕量表达。
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