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western blot 样品有沉淀影响结果吗?怎末处理?
如题所述
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推荐答案 2012-12-11
western çæ ·åä¸å°±æ¯SDS-PAGEçæ ·ååï¼å ä¸SDS-loading buffer ç ®ä¸ä¸ï¼ç¦»å¿å°±å¥½å~~~
ä¸ç¥éä½ æ¯ä¸æ¯è¿ä¸ªé®é¢ãæ好详ç»æè¿°ä¸ä¸ãæ¥èªï¼æ±å©å¾å°çåç
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western
蛋白煮沸后
有沉淀怎么
办
答:
western blot样品
煮蛋白后结块是经常会有现象 如果是SDS-PAGE,加了上样缓冲液后依然煮蛋白后结块,那说明蛋白样品浓度过高,已经超出了SDS可以结合的浓度。建议降低样品的浓度即可 如果没有加含有SDS的上样缓冲液,那么就是蛋白样品被煮沸后变性
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了。加入溶解剂即可 ...
做
western
跑电泳时加样孔里为什么会有残留的蓝色
答:
这对做western并没有影响
,可以直接把浓缩胶部分切掉只做分离胶部分的转膜 那么残留的蓝色就不会影响到转膜的效果
Western blot
实验技术及常见问题分析?
答:
答:有沉淀可能因为你的蛋白没有变性完全,
可以适当提高SDS 浓度,同时将样品煮沸时间延长; 也不排除你的抗原浓度过高,这时再加入适量上样缓冲液即可
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答:
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Western blot
实验最常见的10个问题及解决方案
答:
Western Blot
“淬灭”的原因主要在两方面:含HRP的抗体和发光试剂。由于长期应用某种发光试剂,人们多注意了抗体,不知道发光试剂其实也会对实验
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影响
。对抗体方面来说,可以采用适当降低抗体的浓度,发光实验时快速操作来解决“淬灭”的问题;对发光试剂来说,可以选用发光稳定的发光试剂来解决“...
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