吐温80实验结果不明显

Question

如题所述

Answer 1

吐温80合并温热对BGC-823胃癌细胞热耐受性和HSP70表达的影响
【摘要】
目的：探讨吐温80与41℃温热联合处理对BGC-823胃癌细胞热耐受性和Hsp70表达的影响。
方法：采用吐温80处理后的BGC-823细胞，在41℃温热作用后，于不同时间点进行43℃再次处理。通过细胞生长曲线、克隆形成率分析，以及免疫组化和Western印迹法评估Hsp70的表达水平。
结果：(1)41℃温热处理可诱导BGC-823细胞产生两种热耐受性：一种即时且非Hsp70依赖，另一种为Hsp70依赖性，出现于温热处理后8小时。(2)Hsp70的表达在41℃处理后即刻并未显著改变，但在8小时后达到峰值，主要定位于细胞核内。(3)吐温80与温热联合处理显著抑制了细胞的热耐受性和Hsp70表达。
结论：吐温80与温热联合处理可能通过影响肿瘤细胞质膜系统，有效抑制胃癌细胞的热耐受性和Hsp70表达。
中图号：R739.5
文献标识码：A
文章编号：1000-467X(1999)s0-0030-04
由于温热治疗具有独特性，以及与其他治疗的互补性和协同性，已成为现代肿瘤治疗方法之一。然而，温热治疗后细胞会表达热休克蛋白HSP，形成热耐受性或抵抗性，降低治疗效果。本研究通过观察吐温80与41℃温热联合处理对BGC-823胃癌细胞热耐受性和Hsp70表达的影响，探讨这一联合治疗的机制，为临床应用提供依据。
1材料与方法
1.1细胞培养
使用BGC-823人胃癌细胞系，在含15% FCS的RPMI1640培养液中培养，5% CO2培养箱中37℃培养，取指数生长期细胞进行实验。
1.2加热方法
细胞从37℃培养箱中取出后，立即放入精密加热水浴箱中加热至41℃或43℃，加热时间分别为5分钟和10分钟，根据不同实验需求调整。
1.3分组
实验组细胞在接种24小时后，加入吐温80至终浓度0.1%，47小时后进行41℃温热处理60分钟，间隔一定时间后给予43℃处理。对照组包括41℃+43℃对照和吐温80对照组，空白对照组在37℃培养。
1.4测试指标
1.4.1克隆形成率：细胞接种于24孔板，处理后计算克隆形成率。
1.4.2生长曲线：细胞接种于小培养瓶，处理后绘制生长曲线。
1.4.3Hsp70免疫组化染色：细胞固定后，通过免疫组化方法检测Hsp70表达，并用显微分光度计测定相对含量。
1.4.4Western印迹法：检测处理后细胞中Hsp70的表达水平。