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蛋白质含量测定实验原理
简述几种
蛋白质含量
的
测定
方法及
原理
。
答:
(2)双缩脲法:蛋白质含有多个肽键
,因此有双缩脲反应,即Cu2+与蛋白质的肽键络合,形成紫红色络合物,此物在540nm处有最大的光吸收,可以比色测定,其颜色的深浅与蛋白质浓度成正比。测定范围为0.5~10mg/ml。(3)福林-酚试剂:第一步是双缩脲反应,反应生成的络合物以及酪氨酸、色氨酸残基还原磷...
紫外吸收法测定蛋白质含量
答:
1.掌握紫外吸收法测定蛋白质含量的原理
。2.掌握蛋白质标准浓度曲线的绘制方法。3.了解紫外吸收法的优缺点和适用范围。【实验原理】蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质,吸收高峰在280nm处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。各种蛋白...
说明常用
蛋白质测定
方法的
原理
,并对各种方法加以比较
答:
消化完毕后进行蒸馏,全部蒸馏完毕后用标准盐酸滴定各烧瓶中收集的氨量,
直至指示剂混合液由绿色变回淡紫红色,即为滴定终点,结算出蛋白质含量
。2、双缩脲法 双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540...
bradford法
测定蛋白质含量
的
原理
是什么?应如何克服不利因素对测定的影响...
答:
bradford法测定蛋白质含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色,用分光光度计在吸光度595nm处读数
,通过标准蛋白与G250结合显色建立标准曲线,再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。不利因素主要是特殊蛋白的结构,缓冲液组分中有干扰试剂等。双缩脲法和Folin—酚试剂法...
凯氏定氮法
测定蛋白质含量
的
原理
是什么?
答:
三种试剂分别如下:在凯氏定氮法
测定蛋白质含量实验
中,消化阶段所用的试剂有浓硫酸、硫酸钾、硫酸铜。其中加浓硫酸主要是消化,即是通过加热使硫酸将食物中的有机氮转化成无机氮。加硫酸钾与硫酸铜主要是祈祷催化剂的作用用于加快消化的反应速率。采用凯氏定氮法的注意事项:样品应是均匀的。固体样品应...
怎么
测定蛋白质
的
含量
?
答:
原理
:蛋白质平均含氮量为16%。当样品与浓硫酸共热,蛋白氮转化为铵盐,在强碱性条件下将氨蒸出,用加有指示剂的硼酸吸收,最后用标准酸滴定硼酸,通过标准酸的用量即可求出蛋白质中的含氮量和
蛋白质含量
。②双缩脲法 原理:尿素在180℃下脱氨生成双缩脲,在碱性溶液中双缩脲可与Cu2+形成稳定的...
考马斯亮蓝G-250法
测定蛋白质含量
的
原理
是什么?
答:
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)
测定蛋白质含量
属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250...
说明凯氏定氮法
测定蛋白质
的依据和
原理
,为什么测定结果为粗蛋白?
答:
从凯氏定氮
原理
可以知道:凯氏定氮法是将含氮有机物转变为无机氮硫酸铵来进行
检测
,以得到含氮量的
测定
值乘以一定系数得出
蛋白质含量
。而含氮有机物不仅仅是蛋白质,还有三聚氰胺等等。在加上食品中蛋白质含量的现行国家标准和通行测定方法是经典凯氏定氮法。这就为造假者提供了可乘之机。蛋白质中...
蛋白质含量测定
答:
(一)
实验原理
这种
蛋白质测定
法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了
检测蛋白质
的灵敏度...
测
蛋白质
的
含量
答:
1、学习凯氏定氮法
测定
蛋白质的原理。2、掌握凯氏定氮法的操作技术,包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及
蛋白质含量
计算等。二、
实验原理
蛋白质是含氮的化合物。食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化,使蛋白质分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,留在消化液中,然后加碱蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后,再...
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