求细胞周期检测方法:PI法操作步骤

求细胞周期检测方法:PI法操作步骤

第1个回答  2020-01-24
1、
0.25%胰酶(无EDTA)消化,将细胞消化成单个。(必须消化成单个)。
2、离心收集细胞,弃上清,用预冷PBS洗细胞两次(加3ml,吹悬,离心,弃上清算洗一次)。
3、加入3ml预冷(-20度)70%乙醇到细胞沉淀中,于4度固定过夜(或者,如果实验周期长可以-20℃长期固定)。
4、离心收集细胞,以3mL的PBS洗细胞两次,加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭(PI),100ug/mL
RNase
A,
0.2%
Triton
X-100,
4℃避光孵育30分钟。
5、送实验室,上机
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