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细胞周期检测
细胞周期检测
方法即PI法的操作步骤
答:
1.
细胞
培养:取对数生长期的细胞,按1×106cells/ mL以1mL接种24孔板或2mL接种于6孔板内,进行所需的处理(比如加入药物),特定时间后终止培养,进行下一步的实验。2. 细胞固定: 800rpm离心5min,收集细胞沉淀,弃上清,用预冷PBS洗涤两次,加入预冷75%乙醇,于4℃固定4h以上。3. 细胞染色:1...
求
细胞周期检测
方法:PI法操作步骤
答:
1、0.25%胰酶(无EDTA)消化,将
细胞
消化成单个。(必须消化成单个)。2、离心收集细胞,弃上清,用预冷PBS洗细胞两次(加3ml,吹悬,离心,弃上清算洗一次)。3、加入3ml预冷(-20度)70%乙醇到细胞沉淀中,于4度固定过夜(或者,如果实验
周期
长可以-20℃长期固定)。4、离心收集细胞,以3mL的P...
细胞周期
如何
检测
?
答:
主要操作步骤如下:①组织块用0.25%胰酶消化30min~1h。②200~400目筛网过滤细胞,获得单细胞悬液。③75%乙醇(-20℃预冷)固定细胞1h。④加入PI(终浓度50g/mL)和无DNA酶污染的RNA酶(终浓度50g/mL)1mL染色30min~1h。⑤流式细胞仪
检测细胞周期
和凋亡 细胞凋亡情况观察及凋亡率检测 培养48h...
细胞周期
中限制点和
检测
点?
答:
细胞周期
检验点 细胞周期检验点(checkpoint)是细胞周期调控的一种机制,主要是确保周期每一时相事件有序、全部完成并与外界环境因素相联系。 G1/S检验点:在酵母中称start点,在哺乳动物中称R点(restriction point),控制细胞由静止状态的G1进入DNA合成期,相关的事件包括:DNA是否损伤?细胞外环境是否适宜...
细胞周期检测
实验中细胞染色最佳时间
答:
24小时内。
细胞周期检测
实验是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,其中细胞染色最佳时间是24小时内,荧光强度与PI的结合量呈良好的线性关系。染色是生物显微玻片标本制作中最重要的环节之一。
细胞周期
和细胞增殖的
检测
是否为同一指标?
答:
不是同一指标。细胞增殖检测的是一定数量的细胞经过一段时间的增殖后所产生的细胞数量(绝对细胞数量或相对细胞数量,根据检测方法而定),反映的是细胞生长(增殖)的速度,不能检测出细胞群中G0/G1、S、G2/M等各期细胞的比例。
细胞周期检测
的是细胞群中G0/G1、S、G2/M各期细胞的比例,不能直接...
怎么分析pi staining
细胞周期
答:
PI单染
检测细胞周期
原理:碘化丙啶(Propidium ,简称PI)是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光,并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定,然后根据DNA含量的分布情况,可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。操作...
细胞周期
中存在哪些检验点?以其中一个检验点为例,说明细胞周期的调控...
答:
.在每一个关卡,由细胞气息的状态和环境决定细胞能否通过此关卡,进入下一阶段.现以G2关卡为例,说明
细胞周期
的调控作用:当细胞周期进行到G2关卡时,控制系统
检测细胞
的大小和细胞所处的状态以及细胞内DNA是否复制完毕,如果这些条件合适,就会进入有丝分裂.参考资料:《细胞生物学》 科学出版社 ...
细胞周期
中存在哪些检验点
答:
,G2关卡(在G2期结束点),中期关卡(在中期末).在每一个关卡,由细胞气息的状态和环境决定细胞能否通过此关卡,进入下一阶段.现以G2关卡为例,说明
细胞周期
的调控作用:当细胞周期进行到G2关卡时,控制系统
检测细胞
的大小和细胞所处的状态以及细胞内DNA是否复制完毕,如果这些条件合适,就会进入有丝分裂.
探究
细胞周期
实验的要点
答:
细胞周期检测
可以作为生物相容性评价指标,示例如下: 应用体外细胞培养法,观察不同质量分数羟基磷灰石浸提液对L-929细胞的细胞学形态的影响,同时采用MTT比色法评价羟基磷灰石对L-929生长和增殖的影响,流式细胞仪检测羟基磷灰石浸提液对L-929细胞生长周期及凋亡的影响。结果表明,羟基磷灰石浸提液对体外培养的细胞形态无...
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