会不会是loading buffer放的太多,样品太少?
追答不会,因为loading buffer会跑在最前沿而成为一条蓝色的细线,那条细线最后在染色前是要求切掉的。此外样品太少的的话,如果脱色时间够长也会看到有微弱的条带。
追问确实很微弱 OTL特别微弱 样品的整条带颜色和marker蛋白带颜色差不多,所以样品蛋白看不清,特别模糊
追答还是那句话,你应该在电泳前对蛋白进行初步定量,最简单的就是用分光光度计测280nm的吸光度,按照小牛血清蛋白的标准曲线对浓度进行初步定量(每0.6OD的吸光度为1mg/ml)。然后再上合适的样品上去。如果你实在是没办法获得理想浓度的蛋白的话,那么建议换染色方法,使用灵敏度更高的银染法。
考马斯亮蓝,样品从槽到底都是蓝色,蛋白几乎看不出来
追答恩 楼下说的有道理