考马斯亮蓝G-250的配制：
1.称取100 mg考马斯亮蓝G-250，溶于50 mL 90%乙醇中，
2.加入85%的磷酸100 mL，
3.最后用蒸馏水定容到1 000 mL。
此溶液在常温下可放置一个月。
扩展资料
考马斯亮蓝有G250和R250两种。其中考马斯亮蓝G250由于与蛋白质的结合反应十分迅速，常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢，但是可以被洗脱下去，所以可以用来对电泳条带染色。
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量流程：
该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的，但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0．2%影响测定结果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。
1．Bradford浓染液的配制：将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇，加入100ml85%的磷酸，然后，用蒸馏水补充至200ml，此染液放4℃至少6个月保持稳定。
2．标准曲线蛋白质样本的准备：尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品，例如测定抗体，可用纯化的抗体作为标准。如果待测样本是未知的，也可用抗体作为标准蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之间绘制标准曲线。
3．将待测样本溶于缓冲溶液中，该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同(最好用PBS)。
4．按1：4用蒸馏水稀释浓染料结合溶液，如出现沉淀，过滤除去。
5．每个样本加5ml稀释的染料结合溶液，作用5～30min。染液与蛋白质结合后，将由红色变为蓝色，在595nm波长下测定其吸光度。注意，显色反应不得超过30min．
6．根据标准曲线计算待测样本的浓度。
参考资料：百度百科-考马斯亮蓝法
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第1个回答 推荐于2017-11-25
您好！您确定是是考马斯亮蓝G250，这个是用来蛋白定量的，一般染色用的是R250。
考马斯亮蓝G-250的配制：称取100 mg考马斯亮蓝G-250，溶于50 mL 90%乙醇中，加入85%的磷酸100 mL，最后用蒸馏水定容到1 000 mL。此溶液在常温下可放置一个月。来源：百度文库。
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考马斯亮蓝G-250的配制：称取100 mg考马斯亮蓝G-250，溶于50 mL 90%乙醇中，加入85%的磷酸100 mL，最后用蒸馏水定容到1 000 mL。此溶液在常温下可放置一个月。来源：百度文库。
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