亚硝酸盐的检测方法有很多,举例:
1、重氮偶合法
检测原理 :
纸片上的试剂为固体格利斯试剂(对氨基苯磺酰胺和N21萘基乙二胺) :亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺重氮化,再与N21萘基乙二胺产生偶合反应,生成紫红色偶氮料
适用范围 :
适用检测样品 一般用于下列5类食品的检测 ①蔬菜类; ②肉制品类; ③腌类; ④调味品; ⑤水。
检测方法 :
①取样品适量约10 g左右,绞碎,加水大约25ml混合;
②取出1个试剂条放入溶液中2 s
③从溶液中将试剂条取出,放置1 min;
④观测试剂条底部反应垫所出现时比对试剂瓶外所显示的颜色及浓度;灵敏度(mg/L, ppm) 0,0. 15, 0. 3, 1.0,1.5, 3. 0 (1. 0为美国EPA标准)
⑤目视比色,记录结果,计算公式:x =w ×2510式中: x—亚硝酸盐含量,mg/kg;—试纸条上读数, mg/L
2、盐酸萘乙二胺法
检测原理 :
试样沉淀蛋白质、除去脂肪厚,在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙胺偶合形成紫红色染料,与标准比较定量。
检测范围
香肠、腊肠、火腿、腊肉、肴肉等熟肉制品
检测试剂 :
氯化铵缓冲溶液(pH9.6~9.7)
硫酸锌溶液(0.42mol/L)
氢氧化钠溶液(20g/L)
对氨基苯磺酸溶液
盐酸萘乙二胺溶液(别名N–1–萘基乙二胺)(1g/L)
亚硝酸钠标准溶液(500µg/mL)
显色剂 :临用前将盐酸萘乙二胺溶液(lg/L)和对氨基苯磺酸溶液等体积混合
样品处理 :
称取约10.00g(粮食取5.00 g)经绞碎混匀的样品,置于捣碎机中,加70 mL水和12mL氢氧化钠溶液(20g/L),混匀,用氢氧化钠溶液调pH8,定量转移至200mL容量瓶中,加10mL硫酸锌溶液,混匀,如不产生白色沉淀,再补加2~5mL氢氧化钠,混匀。置60℃水浴中加热10 min,取出后冷至室温,加水至刻度,混匀。放置0.5h,用滤纸过滤,弃去初滤液20mL,收集滤液备用。
测定 :
(1)标准曲线的制备:吸取0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0、2.5、5、10、15、20、25µg亚硝酸钠),分别置于25mL具塞试管中。于标准管中分别加入4.5mL氯化铵缓冲液,加2.5mL60%冰乙酸后,立即加入5.0mL显色剂,加水至刻度,混匀,在暗处放置25min。用1cm比色杯(灵敏度低时可换2cm比色杯),以零管调节零点,于波长550nm处测吸光度,绘制标准曲线。低含量样品制备标准曲线时的标准系列为:吸取0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0、2、4、6、8、10µg亚硝酸钠)。
(2)样品测定 吸取10.0mL样品滤液于25mL比色管中,以下操作按标准曲线制备中自“于标准管中分别加入4.5mL氯化铵缓冲液”起依法操作。同时做试剂空白。
计算:
亚硝酸盐的含量(mg/kg)= A×1000/m×V2/V1×1000
式中:m——样品质量,g; M1——测定用样液中亚硝酸盐的质量,µg;, V1——样品处理液的总体积,mL;V2——测定用样液的体积,mL
参考资料:http://www.foodmate.net/jianyan/lihua/xiangmu/12094.html