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如何把质粒转入大肠杆菌中
如题所述
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推荐答案 2017-05-26
用感受态的细胞法。即用Ca2+处理,使大肠杆菌处于感受态很容易吸收周围的DNA,再将大肠杆菌与质粒混合培养,就转人。
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质粒
pet28a
怎样
转染
大肠杆菌
e.coli
答:
1、 制备含有Amp抗生素的LB平板。2、 取一个1.5ml离心管,加入100μl感受态细胞悬液,置冰上:加入20ul
质粒
T+G(提取的质粒DNA稀释500X),用移液器轻柔混匀。冰上静置20min。3、 42℃水浴中热激90秒,然后迅速置冰上3~5min。整个过程不要振荡菌液。4、 加入1ml LB液体培养基(不含抗生素),...
把目的
质粒
放到
大肠杆菌中
表达培养的方法叫什么的,有几种方法,及其原理...
答:
热激转化主要运用氯化钙处理大肠杆菌细胞
,使其细胞壁细胞膜出现“穿孔”,这样通过冰浴及热激作用将重组质粒转进细胞内。点击转化则主要通过短时高压使细胞“穿孔”进而将重组质粒导入细胞。
当
质粒
转化进
大肠杆菌
时,通过什么原理表达目的基因
答:
随后,加入LB培养液,于37℃振动培养可使细菌复苏,并且表达
质粒
编码的抗生素抗性基因,提高转化效率。转化成功的大肠杆菌可以在相应抗生素培养皿中传代,形成菌落。由于大肠杆菌繁殖快,在适宜的条件下繁殖一代仅需要20~30分钟,而且常用质粒可以在
大肠杆菌中
达到几百个拷贝,因此,通过对转化成功的大肠杆菌...
如何将
一个
质粒
dna
转入
到
大肠杆菌
感受态细胞中?并且如何鉴别是否转化成 ...
答:
在楼上说的“通常使用选择培养基来筛选
大肠杆菌
。例如重组
质粒
上带有抗四环素基因,那么使用带有四环素的选择培养基,
将
待测大肠杆菌接种到选择培养基,只有成功
转入
重组质粒的大肠杆菌才能在选择培养基生长”的基础上,也可将待测大肠杆菌接种到另一种抗生素培养基中,转化成功则不长,也是一种加强的反向...
重组
质粒
是通过什么方式进入
大肠杆菌
的?是简单扩散,还是什么?
答:
取决于你的转化方式。经典的化学转化,是经化学试剂处理(如氯化钙)使得细胞表面形成裂痕。而电击转化是形成电穿孔。要是非讲
质粒
这个大分子的运动方式,当然是简单扩散,但是细胞表面不形成孔扩散不过去。
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质粒转入大肠杆菌步骤
重组质粒为什么要先转入大肠杆菌
质粒转入大肠杆菌有什么用
将质粒转入大肠杆菌的过程属于
质粒转大肠杆菌
质粒提取中大肠杆菌的要求
质粒导入大肠杆菌
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