wb跑电泳跑到什么位置合适

Question

如题所述

Answer 1

SDS-PAGE跑电泳时，跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的。

对于分子量十分大的片段，可以用脉冲场凝胶电泳。也可以延长电泳时间（此时前面的小分子DNA可能会跑出胶外。如果你要的只是大片段，延长电泳时间还是可行的。毕竟脉冲场凝胶电泳要特殊设备。

试剂准备：

1、SDS-PAGE试剂：见电泳实验。

2、匀浆缓冲液：1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.0ml；10%SDS 6.0ml；β-巯基乙醇 0.2ml；ddH2O 2.8ml。

3、转膜缓冲液：甘氨酸 2.9g；Tris 5.8g；SDS 0.37g；甲醇200ml；加ddH2O定容至1000ml。

4、0.01M PBS(pH7.4)：NaCl 8.0g；KCl 0.2g；Na2HPO4 1.44g；KH2PO4 0.24g；加ddH2O至1000ml。

5、膜染色液：考马斯亮蓝 0.2g；甲醇80ml；乙酸2ml；ddH2O118 ml。包被液（5%脱脂奶粉，现配）：脱脂奶粉1.0g 溶于20ml的0.01M PBS中。