Western blot化学发光(ECL)时，条带特别弱势怎么回事啊？有哪些步骤是需要注意的吗？

Question

如题所述

Answer 1

条带弱和整张膜发光原因是不同的。条带弱一般是因为表达量低，或者一抗的问题，比如质量不好或浓度太低或孵育时间太短。整张膜发光则是因为发光液的杂质含量太多，一抗洗涤不充分也可能导致整张膜发光。
把一抗、洗涤和封闭的原因排除之后，仍然有整张膜发光，那就是发光液的质量问题。所以选择质量好的发光液关乎实验成败。如果背景不高，条带很弱的话，我们一般是换用高灵敏度的发光液，从超敏的换成极敏的，一般都能解决。

Answer 2

如前面这位朋友所说，抗体浓度，曝光时间都会影响，发光试剂也会有影响，选择合适的抗体非常关键，也要选择好的发光试剂，我们实验室用的炎熙生物的极敏型化学发光试剂盒，很好用，很节约抗体，灵敏度高，达到低飞克极的灵敏度，并且信号持续时间长，信号也很强，不会出现你所说的条带很弱的情况。可以去了解一下。祝实验顺利。

Answer 3

曝光时间太长,抗体浓度过高,洗涤不充分,封闭不充分,发光试剂不好都有可能造成整张膜都发光.跟蛋白样品的蛋白量应该是没有关系的.本回答被网友采纳