怎么检测超氧化歧化酶活性？

Question

如题所述

Answer 1

当被测样品中含有SOD时，则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值。如果用分光光度计，最好设定黑暗和照光作为对照。

依据SOD能抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O₂，可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，后者在560nm处有最大吸收。

而SOD可清除O₂，从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。

扩展资料：

超氧化物歧化酶里的自由基会对机体产生诸多危害，但是在一般的条件下人体细胞内也存在着清除自由基、抑制自由基反应的体系，它们有的属于抗氧化酶类，有的属于抗氧化剂。

作为有害物质的超氧阴离子在SOD的作用下和氢离子反应，生成过氧化氢；过氧化氢又在过氧化氢酶的作用下和氢离反应，最终生成了水。

人体清除第一步反应所生成的过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化氢酶体，因而作为治疗手段的药用SOD若与过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化氢酶合并使用，其治疗效果将更好。

参考资料：百度百科-超氧化物歧化酶

Answer 2

超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，简称SOD）是一种在所有氧化还原生物体内都存在的酶，它可以催化超氧阴离子（O2-）自身歧化为氧气（O2）和过氧化氢（H2O2）。由于它在抗氧化防御机制中的重要性，对其活性的测定在许多生物医学研究中都是非常重要的。
通常使用的SOD活性检测方法之一是基于抑制超氧阴离子引起的吡啶并[3,4-d]吡啶-1,10-酚(PYR)自氧化的能力来测定。这个过程中，超氧阴离子会被SOD转化为过氧化氢和氧，从而减少PYR的自氧化。这个过程可以使用光谱光度计在560nm处测量PYR的吸光度降低，从而反映出SOD的活性。
以下是一种常见的SOD活性检测步骤：
1. 样品准备：将含有SOD的样品（如组织提取物或纯化的SOD酶）添加到适当的缓冲溶液中。
2. 反应：将样品、PYR和产生超氧阴离子的合适试剂（如醌醇或呋喃四唑）混合在一起。
3. 测量：在设定的时间点，使用光谱光度计在560nm处测量吸光度的变化。
4. 分析：使用适当的标准曲线，将吸光度变化转化为SOD活性。
需要注意的是，由于各种原因（如样品的性质、实验条件等），在实施这个方法时可能需要进行一些优化。另外，还有许多其他的方法可以用来测定SOD活性，包括一些基于电化学、荧光和免疫学原理的方法。