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超氧化物歧化酶sod测定
如何
测定SOD的
活性?
答:
当被测样品中含有
SOD
时,则对
超氧
阴离子自由基有专一性的抑制作用,使形成的亚硝酸盐减少,比色时
测定
管的吸光度值低于对照管的吸光度值。如果用分光光度计,最好设定黑暗和照光作为对照。依据SOD能抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定
酶
活性大小。在有
氧化
物质存在下,核黄素可被光还原,被...
超氧化物歧化酶测定
答:
1、BT法(硝化蓝法):这是最早用于测定SOD活性的方法之一
。基本原理是将一种化学染料NBT(硝化蓝)还原成紫色的NBT形式,超氧阴离子自由基参与了这个反应。超氧化物歧化酶可以清除产生的超氧阴离子,从而减缓NBT的还原速率。通过测定NBT的消失速率,可以间接测定SOD的活性。2、XOD法(黄嘌呤氧化酶法)...
sod测定
方法有哪些
答:
超氧化物歧化酶
(SOD)的催化底物是O2,一般多以一定时间内产物生成量或底物的消耗量作为酶活性单位。由于O2自身很不稳定,且不易制备,
测定SOD的
方法除少数采用直接法外,一般多为间接法。1.直接法原理是根据O2或产生O2的物质本身的性质测定O2的歧化量,从而确定SOD的活性。经典的直接法包括:脉冲辐射...
氮蓝四唑NBT法测
超氧化物歧化酶
的具体步骤
答:
超氧物歧化酶
(superoxidedismutase,
SOD
)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有
氧化
物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2,可将氮蓝四唑还原为蓝...
羟胺法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性
具体步骤
答:
每ml反应液中
SOD
抑制率达50%时所对应的SOD量为一个单位。式中: A──对照管OD B──
测定
管OD V──反应液总量(ml)N──样品稀释倍 W──取液量 也可用
酶
比活法即以每管样品的百分抑制率从SOD标准曲线查出相应的SOD U/ml, 乘以稀释倍数(1ml/取样量)。若样品为组织匀浆液, 根据匀浆浓度或...
超氧化物歧化酶
的临床意义
答:
超氧化物歧化酶
的临床意义:在国外,
SOD
常用于对缺血、出血性心、脑等重要脏器病伤(或手术治疗后)引发的继发性(自由基)过氧化损伤及其自由基清除药物治疗效果的监测,以指导临床制定相应的自由基清除干预对策及最佳治疗时间窗的确立,它对自由基继发损伤病情的诊断、自由基清除治疗疗效跟踪和预后判断与...
SOD酶
的活力的
测定
答:
SOD酶
的活力的
测定
方法如下:1.直接法 原理是根据O2 或产生O2 的物质本身的性质测定O2 的
歧化
量,从而确定
SOD的
活性。经典的直接法包括:脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法(EPR)、核磁共振法。由于所需的仪器设备价格昂贵,一般较少应用。2.一般化学法 这些方法的共同特点是要有一个O2 的产生体系...
在什么情况下才测抗
氧化酶
活力
答:
抗
氧化酶
(
SOD
、POD、CAT)活性
测定
方法 一、
超氧化物歧化酶
(SOD)活性测定(氮蓝四唑光化还原法) 1、试剂的配制 、(1)0.05mol/L 磷酸缓冲液(PBS,pH7.8): A 母液:0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液: 取 Na2HPO4·12H2O(分子量 358.14)71.7g; B 母液:0.2mol/L 磷酸二氢钠溶液:取 NaH2PO4·2H2O(分子量 156.01...
如何用邻苯三酚法
测定超氧化物
岐
化酶
的活性?
答:
在一般情况下,
SOD酶
活性
测定
只能应用间接活性测定法。本实验采用邻苯三酚自
氧化
方法。邻苯三酚在碱性条件下,能迅速自氧化,释放出O2 -,生成带色的中间产物,反应开始后反应液先变成黄棕色,几分钟后转绿,几小时后又转变成黄色,这是因为生成的中间物不断氧化的结果。这里测定的是邻苯三酚自氧化...
SOD
POD活性的
测定
方法
答:
SOD
(
超氧化物歧化酶
活性)的
测定
试剂:① 0.05mol/l磷酸缓冲液(PH值为7.8)。②提取介质:50mmol/l PH值为7.8磷酸缓冲液(内含1%聚乙烯吡咯烷酮)。③130 mmol/l甲硫氨酸(Met)溶液:称1.3991g Met,用磷酸缓冲溶液溶解并定容至100ml。④750umol/l NBT:称取0.06133gNBT,用磷酸缓冲...
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