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最近做WB,发现SDS-PAGE上样后开始电泳不久就看见LOADING BUFFER漏到分离胶和浓缩胶分界,请各位指教
如题所述
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其他回答
第1个回答 2011-03-26
一、可能是玻璃板没有加紧
二、浓缩胶没有凝固好,灌胶的问题
三、电压是否大了?我们常用浓缩胶80v,30min.
灌胶的问题可能性比较大,祝实验顺利
本回答被网友采纳
第2个回答 2011-03-20
这就对了
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wb
跑
电泳
跑到什么位置合适
答:
SDS-PAGE
跑电泳时,跑到
浓缩胶和分离胶
分界处时一般是要换电压的。对于分子量十分大的片段,可以用脉冲场凝胶电泳。也可以延长电泳时间(此时前面的小分子DNA可能会跑出胶外。如果你要的只是大片段,延长电泳时间还是可行的。毕竟脉冲场凝胶电泳要特殊设备。试剂准备:1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2、匀...
SDS-PAGE电泳
求助专题
答:
根据样品分离目的不同,
主要有三种处理方法:还原SDS处理、非还原SDS处理、带有烷基化作用的还原SDS处理
。1、还原SDS处理:在上样buffer中加入SDS和DTT(或Beta巯基乙醇)后,蛋白质构象被解离,电荷被中和,形成SDS与蛋白相结合的分子,在电泳中,只根据分子量来分离。一般电泳均按这种方式处理,样品稀释适...
请帮我分析下
SDS-PAGE电泳
图
答:
电压过高,导致凝胶变型,局部浓度变化,使得蛋白跑不下去
。建议加强电泳时的冷却。可以放在4度冰柜里面跑
请教
sds-page
高手
答:
1)还原SDS处理:在
上样buffer
中加入
SDS和
DTT(或β-巯基乙醇)后,蛋白质构象被解离,电荷被中和,形成
SDS与
蛋白相结合的分子,在电泳中,只根据分子量来分离。一般电泳均按这种方式处理,样品稀释适当浓度,加入
上样Buffer,
离心,沸水煮5min,再离心加样。2)带有烷基化作用的还原SDS处理:碘乙酸胺的...
wb电泳
电压电流及时间的选择
答:
wb电泳
电压电流及时间的选择:300mA90分钟,是1.0的胶厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚胶要时间长一些,另外做的蛋白如果超过100kd建议时间更长一些,若是小蛋白就减少转模时间,立春红确定最适时间。
SDS-PAGE
跑电泳时,跑到
浓缩胶和分离胶
分界处时一般是要换电压的。具体是40变60还是80变120要...
大家正在搜
什么样的发现和发明
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