SDS-PAGE电泳中，分离胶和浓缩胶的配方是不是只有Tris-Cl的PH不同

如题所述

推荐答案 2017-04-24

SDS-PAGE电泳中，分离胶和浓缩胶的配方是不是只有Tris-Cl的PH不同
在SDS－PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统.在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低；而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动.由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带.当样品进入分离胶后,由于胶中pH的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶孔径的缩小,在电场的作用下,蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离.

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SDS- PAGE的浓缩胶和分离胶的pH是一样的吗?答：在SDS-PAGE中，分离胶和浓缩胶中tris-Hcl的pH值不同，主要是因为它们的作用和配方不同。分离胶的主要作用是分离蛋白质，它的配方中含有更高浓度的Tris-Hcl，pH范围在8.9左右。这种高pH环境有助于使蛋白质更好地分离，因为蛋白质的带电性会随着pH值的升高而改变，使它们更容易在电场中移动。同时，...

...分离胶和浓缩胶中缓冲液的组分,pH值异同?它们与电极缓冲液有区别...答：分离胶是下层胶，其中的缓冲液为pH8.8的Tris-HCl。浓缩胶是上层胶，其中的缓冲液为pH6.8的Tris-HCl。电泳缓冲液为Tris、glycine和SDS配制，只要用规定质量的粉末配制，就不用调pH。

SDS-PAGE中上层胶为什么用pH6.8下层胶用pH8.8?答：上层的浓缩胶用的是Tris-HCL缓冲液，PH6.8，HCL的解离度大，几乎全部成CL-，CL-在电场中移动最快。而电泳槽中含有甘氨酸，在PH6.8时只有少量解离，在电场中移动的最慢。蛋白质（被夹在中间）就在由快慢离子形成的电位梯度中被浓缩了。下层的分离胶用的是Tris-甘氨酸缓冲液，PH8.8，在此PH下，...

SDS-page电泳缓冲液,样品缓冲液,分离胶缓冲液的区别答：电泳缓冲液是Tris-甘氨酸电泳缓冲液。上样缓冲液是SDS缓冲液，需要加入Tris-Hcl，DTT，SDS，溴酚蓝和甘油。分离胶配制过程中的缓冲液是PH8.8的Tris-Hcl 浓缩胶配制过程中的缓冲液是PH6.8的Tris-Hcl

聚丙烯酰氨凝胶电泳的常见问题答：在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间...

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