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考马斯亮蓝法测蛋白质含量标准曲线
考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度
存在的误差?
答:
1、去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)和0.1N的NaOH会对实验结果有影响 2、
标准曲线
有轻微的非线性
考马斯亮蓝测定蛋白质浓度
是较常用的方法,误差可尽量减到最小,需注意:测定OD值前,将分光光度计提前预热至少30分钟,可保证准确性;配制好的考马斯亮蓝溶液应放于4度保存备用;盐...
bradford
法测定蛋白质含量
的原理是什么?
答:
bradford
法测定蛋白质含量
,也就是
考马斯亮蓝法
,其原理是考马斯亮蓝在游离状态下呈棕红色,最大光吸收在488nm; 当它与蛋白质结合后变为蓝色,蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝结合在2min左右的时间内...
用
考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度
,画出A(吸光度)c(浓度)
标准曲线
图以后怎么...
答:
有
标准曲线
就有比吸光度了(A/C)用待测样本的吸光度除以它就好
如何准确
测定
样品中
蛋白质
的
含量
答:
因此双缩脲法常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。 2、试剂与器材 (1)试剂:a、
标准蛋白质
溶液:用标准的结晶牛血清清蛋白或标准酪蛋白,配制成10mg/ml的标准蛋白溶液,可用bsa
浓度
1mg/ml的a280为0.66来校正其纯度。 如有需要,标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮
法测定蛋白
氮
含量
,计算出其纯度,再...
蛋白质含量
的
测定
方法
答:
五、Lowry法:实验原理:蛋白质在碱性溶液中其肽键与Cu2+螯合,形成蛋白质一铜复合物,此复合物使酚试剂的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,在一定条件下,利用蓝色深浅与蛋白质浓度的线性关系作
标准曲线
并测定样品中蛋白质的浓度。六、考马斯亮蓝法:实验原理:
考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度
,是利用蛋白质―...
标准蛋白质
样品能否用
考马斯亮蓝法测定
?为什么?
答:
公式是根据测量结果自己算出来的:
考马斯亮蓝
比色法是由bradford等人建立 的1种测定微量
蛋白质
的方法l5],考马斯亮蓝所含疏 水基团在酸性条件下与蛋白质的疏水微区具有亲和力,通过疏水作用与蛋白质相结合,形成的蓝色蛋白质一染料复合物,在595 nm处有最大吸光度,复合物1 h内保持稳定。在一定的蛋白...
bradford
法测定蛋白质含量
的原理是什么?应如何克服不利因素对测定的影响...
答:
Bradford法,也称
考马斯亮蓝法
,是通过蛋白质与考马斯亮蓝结合后产生的颜色变化来
测定蛋白质含量
。其基本原理是,亮蓝在电离状态下显示棕红色,与蛋白质结合后变为蓝色,吸收光峰在595nm处,吸光值与蛋白质含量成正比。反应快速,通常在2分钟内达到平衡,且试剂制备简单,操作简便,灵敏度高,是微克级...
考马斯亮蓝
G-250
测定蛋白质含量
应该注意什么/
答:
做
标准曲线
时,其回归方程的相关系数应达到3个9(即r值至少为0.999),标准曲线方可用。试剂或仪器更换,一定重新做标准曲线。测定样品的条件一定要与做标准曲线的条件相一致。
蛋白
糖化物对考马斯亮蓝法存在干扰,因此,应用
考马斯亮蓝法测定含
糖基蛋白的制品时需进一步改进。去污剂(如 Triton X-100、...
为什么用Folin酚法和
考马斯亮蓝法测蛋白质含量
,结果会有很大差异_百度...
答:
标准曲线
不是严格的直线形式,且专一性差。因此,各方法并不能在任何条件下适用于任何形式的
蛋白质
。Folin酚法干扰物质较多,不适于硫柳汞做防腐剂的样品和核酸
含量
较高的样品检测;蛋白糖化物对考马斯亮蓝法存在干扰,因此,应用
考马斯亮蓝法测定
含糖基蛋白的制品时需进一步改进。
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
实验中,使用的水一定是蒸馏水吗?为什么...
答:
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
实验中,使用的水最低要求是蒸馏水,更高精度要求可能会使用双蒸水。因为Bradford检测中要用的试剂配制,
标准曲线
的制作都要用到水。如果不是使用蒸馏水,可能水里面会有一些游离的离子或者电解质,会影响试剂配制的准确性,干扰实验结果。而水中残留的有机物等可能会和考马斯...
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