55问答网
所有问题
当前搜索:
pi检测细胞周期原理
请教流式细胞术
PI
染色进行
细胞周期
分析的
原理
答:
实验原理:流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室
。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化...
细胞周期
如何
检测
?
答:
主要操作步骤如下:①组织块用0.25%胰酶消化30min~1h。②200~400目筛网过滤细胞,获得单细胞悬液。③75%乙醇(-20℃预冷)固定细胞1h。④加入
PI
(终浓度50g/mL)和无DNA酶污染的RNA酶(终浓度50g/mL)1mL染色30min~1h。⑤流式细胞仪
检测细胞周期
和凋亡 细胞凋亡情况观察及凋亡率检测 培养48h...
求
细胞周期检测
方法:
PI
法操作步骤
答:
1.
细胞
培养:取对数生长期的细胞,按1×106cells/ mL以1mL接种24孔板或2mL接种于6孔板内,进行所需的处理(比如加入药物),特定时间后终止培养,进行下一步的实验。2. 细胞固定: 800rpm离心5min,收集细胞沉淀,弃上清,用预冷PBS洗涤两次,加入预冷75%乙醇,于4℃固定4h以上。3. 细胞染色:1...
流式细胞仪
测定细胞周期
各时相的
原理
和基本步骤(不用说具体使用的量...
答:
培养一段时间后(一般小于一个
细胞周期
),固定细胞。根据所使用模拟核苷酸的不同,使用不同的方法。EdU,改变缓冲液的pH值,就会发出荧光。而BrdU则需用荧光抗体识别,需要对细胞膜和核膜进行通透处理。再加入
PI
对DNA染色。在二维坐标图上,横坐标设为线性PI荧光强度,纵坐标设为模拟核苷酸的荧光强度(log...
索莱宝
细胞周期
与细胞凋亡
检测
试剂盒的说明书有吗
答:
碘化丙啶(Propidium,简称
PI
)是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光,并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量
测定
,然后根据DNA含量的分布情况,可以进行
细胞周期
和细胞凋亡分析。碘化丙啶染色后,假设G0/G1期...
Annexin Ⅴ-FITC/
PI
能否用于
测定细胞周期
答:
Annexin V-FITC/
PI
是用来测细胞凋亡的,
测细胞周期
可以用其中的PI,但用Annexin V-FITC/PI来测细胞周期比较浪费试剂。测细胞周期的大致步骤如下:1. 收集1 x106个细胞,1500rpm离心5 min,弃上清。同样离心条件下,用4℃预冷的PBS洗细胞两次。2. 完全去除上清,加入-20℃预冷的70%乙醇1 ...
求
细胞周期检测
方法:
PI
法操作步骤
答:
2、离心收集
细胞
,弃上清,用预冷PBS洗细胞两次(加3ml,吹悬,离心,弃上清算洗一次)。3、加入3ml预冷(-20度)70%乙醇到细胞沉淀中,于4度固定过夜(或者,如果实验
周期
长可以-20℃长期固定)。4、离心收集细胞,以3mL的PBS洗细胞两次,加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭(
PI
),100ug/mL RNase ...
凋亡及
细胞周期
数据如何看
答:
在M期完成遗传到子细胞中的均等分配,使细胞进行分裂。
细胞周期检测
中
PI
最为常用。PI为插入性核酸荧光染料,能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合,其结合的量与DNA的含量成正比例关系,用流式细胞仪进行分析,就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态,从而计算出各个期的百分含量。
处理
PI
染色
细胞周期
数据
答:
不管看哪个图,只要是加药处理组和对照组之间相比较S期减少了,就可以说明阻滞了其增值,但是想要看阻滞在
周期
中的哪个环节就要分析一下对应比例的上调和下调。还有就是一定要记得同步化。
细胞周期
流式结果怎么解释
答:
你这个实验如果只是做了
PI
单染,是不能得出这个结论的,只能说明S期比例减少。PI的染色结果不能说明动态原因。可能的原因既可以是G1阻滞,也可能是S期加速了。所以要看具体的动态原因,必须做BrdU+PI的动态实验。你同时做几个盘子的
细胞
,BrdU 短暂染色后,在不同时间取样本上机
检测
。如果是G1阻滞,那...
1
2
3
4
5
涓嬩竴椤
其他人还搜
pi染色细胞周期原理
细胞周期检测固定
pi染色检测细胞周期
流式细胞仪怎么看细胞周期
流式细胞周期
细胞周期的时间是如何测定的
细胞周日期染色
PI染色细胞周期过程
细胞周期测定方法