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hrp标记的方法
tmb和
hrp
显色原理
答:
TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)和HRP(辣根过氧化物酶)是常用的生物化学显色试剂,常用于酶标记实验中。它们的显色原理如下:TMB显色原理:TMB是一种底物,可以被辣根过氧化物酶(HRP)催化氧化而产生显色产物。在酶标记实验中,通常将TMB与过氧化氢(H2O2)混合,然后加入
HRP标记的
抗体或其他...
ELISA
HRP标记
技术原理及步骤是什么?
答:
原理:利用抗原能吸附到固相载体表面的特性,使抗原抗体反应在固相载体表面进行的免疫酶技术,从而简化了抗原抗体结合物分离的手续。基本步骤:1包被:既是把抗原或抗体吸附到固相反应板上;2抗原抗体反应;3酶促反应。
骨组织免疫组化实验步骤(
HRP
-DAB法)
答:
4. 封闭 5%BSA封闭液 37℃ 30min, 甩干不洗。 5. 孵育一抗 TBS或PBS稀释一抗。4℃湿盒过夜。6. 孵育二抗 TBS 5min×5。 3%H 2 O 2 滴加于切片上,室温避光10min。 滴加聚合
HRP标记
二抗,37℃,30min。 TBS 5min×5。 7. DAB显色 依照DAB...
怎么样正确的进行ELISA试剂盒的检测
答:
辣根过氧化物酶的标记常用此法。反应时,过碘酸钠将
HRP
分子表面的多糖氧化为醛基很活泼,可与蛋白质上的氨基形成Schiff氏碱而结合。酶标记物按克分子比例联结,其最佳比例为:酶/抗体=1-2/1。此法简便有效,一般认为是HRP最可取的
标记方法
,但也有人认为所有试剂较为强烈,各批实验结果不易重演。按...
Western-blot实验ECL发光检测实验步骤
答:
ECL Western特异发光检测试剂盒用于辣根过氧化物酶(HRP)
标记的
蛋白或核酸检测。下面以engreen的超敏型ECL发光液Enlight-Plus为例,说一下检测实验步骤。1. 常规电泳、转膜、
HRP 标记
抗体或核酸探针孵育、洗膜。以下操作在室温进行。注意:Enlight-Plus 推荐的抗体稀释度为:储存液浓度为1mg/ml 的一抗推荐...
生理中
hrp
是什么意思?
答:
结果准确可靠、重复性好等特点,已成为血清学检测中不可或缺
的方法
之一。在医学领域中,
hrp
的水平变化与多种病理生理状态有关。例如,感染、肿瘤、自身免疫疾病等,会导致hrp的水平发生变化。因此,检测hrp的水平可以帮助临床医生早期发现并诊断疾病,同时也可以作为观察病人治疗效果的指标之一。
求助
HRP标记
抗体纯化后抗体浓度的确定
方法
答:
HRP标记
抗体纯化后抗体浓度的确定
方法
一抗的用量和样品中的目标分子含量相关,如果含量较高,就不需要用太多一抗,以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度(义翘神州会提供抗体用量、天然细胞株检测结果),如果样品与厂家的不是一种细胞,可以尝试上下摸索一两个浓度梯度;二抗的用量,和你...
Western免疫印迹的分类
答:
western显色
的方法
主要有以下几种:i.放射自显影ii.底物化学发光ECLiii.底物荧光ECFiv.底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验条件的是用第一种方法,目前发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行,操作也比较简单,原理如下(二抗用
HRP标记
):反应底物为...
酶
标记
抗体的注意事项
答:
1. 在具备高质量
HRP
的条件下,所要
标记的
抗体也要活性高,效价高(最低1∶16),纯度高,亲和力好,这是保证标记物效价高,免疫活性好的首要条件。2. 所使用试剂的PH和浓度及用量必须严格掌握。所用试剂,最好(或必需)新鲜配制。如在戊二醛标记法中所用戊二醛应为新鲜纯品,因戊二醛储存过久可形成缩...
酶标抗体制备技术的辣根过氧化物酶标抗体制备技术
答:
辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,
HRP
)广泛分布于植物中,因辣根中含量最高而得名,由无色酶蛋白和深棕色铁卟啉(辅基)构成一种糖蛋白(含糖18%)。此酶溶于水和50%饱和度以下的硫酸铵溶液。HRP分子量较小(40kDa),
标记
物容易穿透入细胞内部;作用底物为H2O2,以二氨基联苯胺(DAB)为供...
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