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超氧化物歧化酶含量的测定
超氧化物歧化酶的测定
答:
超氧化物歧化酶
(SOD)的催化底物是O2 ,一般多以一定时间内产物生成量或底物的消耗量作为酶活性单位。由于O2 自身很不稳定,且不易制备,
测定
SOD的方法除少数采用直接法外,一般多为间接法。1.直接法 原理是根据O2 或产生O2 的物质本身的性质测定O2 的歧化量,从而确定SOD的活性。经典的直接法包括...
超氧化物歧化酶测定
答:
超氧化物歧化酶可以清除产生的超氧阴离子,从而减缓NBT的还原速率。
通过测定NBT的消失速率,可以间接测定SOD的活性。2、XOD法(黄嘌呤氧化酶法)
:这种方法利用黄嘌呤氧化酶将黄嘌呤转化为尿酸的反应,过程中产生的超氧阴离子会被SOD清除。测定尿酸的生成速率可以用来测定SOD的活性。3、氰化铁法:这种方法...
氮蓝四唑NBT法测
超氧化物歧化酶的
具体步骤
答:
2. 显色反应 取5ml指形管(要求透明度好)4支,2支为
测定
管,另2支为对照管,按下列加入各溶液:试剂(
酶
)用量(ml)终浓度(比色时)0.05mol/L 磷酸缓冲液1.5130mmol/L Met溶液0.313mmol/L 750μmol/L NBT溶液0.375μmol/L 100μmol/L EDTA-Na2液0.310μmol/L 20μmol/L 核黄...
怎么检测
超氧化歧化酶
活性?
答:
当被测样品中含有SOD时,则对
超氧
阴离子自由基有专一性的抑制作用,使形成的亚硝酸盐减少,比色时
测定
管的吸光度值低于对照管的吸光度值。如果用分光光度计,最好设定黑暗和照光作为对照。依据SOD能抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定
酶
活性大小。在有
氧化
物质存在下,核黄素可被光还原,被...
超氧
活
物歧化酶
活性
测定
的方法有哪些
答:
过
氧化物酶
能使愈创木酚氧化,生成茶褐色物质,该物质在 470 nm 处有最大吸收,可用分光光度计
测量
470 nm 的吸光度变化
测定
过氧化物酶活性. 二、实验材料、试剂与仪器设备 (一)实验材料 马铃薯块茎. (二)试剂 1 . 100 mmol / L 磷酸缓冲液 pH6.0 (见附录). 2 .反应混合液:...
超氧化物歧化酶
活性
测定
答:
1.
酶
液制备 称取植物组织0.5g先加入2.5ml PBS,研磨匀浆后,再加入2.5ml PBS混匀,4℃下10000r/min离心15min 上清液即为粗酶液。取部分上清液经适当稀释后用于酶活性
测定
。2.酶活性测定 取10ml小烧杯7只, 3只测定样品,4只作为对照,将上述试剂混匀后,1只对照烧杯至于暗处,另3只对照烧杯和...
羟胺法
测定超氧化物歧化酶
(SOD)活性 具体步骤
答:
式中: A──对照管OD B──
测定
管OD V──反应液总量(ml)N──样品稀释倍 W──取液量 也可用
酶
比活法即以每管样品的百分抑制率从SOD标准曲线查出相应的SOD U/ml, 乘以稀释倍数(1ml/取样量)。若样品为组织匀浆液, 根据匀浆浓度或组织蛋白质
含量
, 将单位换算为U/g组织或U/mg蛋白。
SOD
酶
的活力
的测定
答:
SOD
酶
的活力
的测定方法
如下:1.直接法 原理是根据O2 或产生O2 的物质本身的性质测定O2 的
歧化
量,从而确定SOD的活性。经典的直接法包括:脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法(EPR)、核磁共振法。由于所需的仪器设备价格昂贵,一般较少应用。2.一般化学法 这些方法的共同特点是要有一个O2 的产生体系...
超氧化物歧化酶
简介
答:
4.2 分类 血液生化检查 > 酶类测定 4.3
超氧化物歧化酶的测定
原理 超氧化物歧化化物歧化酶是一类广泛分布于生物体细胞内的金属酶,它能特异催化超氧化物阴离子(O2-)发生歧化反应:,H2O2再经过
氧化化
氢酶(CAT)作用,转化成H2O和O2,从而清除O2的毒性作用。人体内的SOD按其辅基...
酶
活性
测定
的原理是什么
答:
超氧物歧化酶
(Superoxide dismutase,SOD)活性
的测定
SOD采用氮蓝四唑(nitro-blue tetrazolium,NBT)法(Beauchamp和Fridovich,1971)。反应步骤为:取200μl粗提液,加入3.7 ml NBT反应液50mmol/LpH7.8的磷酸缓冲液(PBS)配制的含77.12μmol/L氮蓝四唑, 100μmol/LEDTA-Na2和13.37mmol...
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