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考马斯亮蓝测定蛋白质含量偏小
用
考马斯亮蓝测蛋白质含量
为什么比凯式定氮法的含量低?
答:
凯氏定氮是用蛋白质含氮量约为16%的经验通过测定氨含量推算
蛋白质含量
的,故可能因为样品中含有含氮物质导致结果偏高。而
考马斯亮蓝
是直接与蛋白质反应产生蓝色,故结果较为准确。
您好,请教一下,我用的
考马斯亮蓝法测
污泥
蛋白质
,为什么样品比空白组...
答:
出现这个情况可能是你的样品中的蛋白质含量确实很低,低过一定浓度时,结果就没有参考价值了
。也有
可能是考蓝工作液存放时间太久失效了
,可以用一些蛋白标准品(比如BSA)来检验一下考蓝工作液是否正常。如果要用缓冲液做空白组的话,就用和蛋白样品一样的缓冲液就可以了 ...
我在做
考马斯亮蓝测蛋白质含量
,在标准曲线制作时。老师要求R值0.99以 ...
答:
没做过这个实验 但是可以确定的是做曲线这个活儿 要看运气 配标准品时量具要准 尽量小体积来配制 这样可以用枪 枪比其他量具的稳定性(误差拨动小)好 用小体积的标准品时 可以用96孔酶标板来测定OD值 保证测量误差均一 我现在做
蛋白浓度测定
是用的pierce的BCA试剂盒 用酶标板测定 r值一般在0.997...
为什么制作
考马斯亮蓝蛋白质
标准曲线时,
蛋白质含量
少的和含量多的吸光...
答:
首先,
查看一下你的比色皿是否是洁净的,标准曲线所用蛋白最好是BSA,且需要完全溶解(最好是稀释一下
,如果你的目的蛋白估计超过这个范围,也稀释一下);其次,标准曲线的各个样品必须是由同一母液稀释得到的,例如你要100ng/ul-1000ng/ul,建议采用1000ng/ul的母液稀释,如果你分别配制,会增大偶然...
考马斯亮蓝
g250与
蛋白质
的络合物 放置过久
测量
值为何会偏低
答:
络合物在形成半小时内最稳定,颜色也最稳定,所以测量要尽可能在短时间内完成。
考马斯亮蓝
法
测定蛋白质浓度
存在的误差?
答:
1、去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)和0.1N的NaOH会对实验结果有影响 2、标准曲线有轻微的非线性
考马斯亮蓝测定蛋白质浓度
是较常用的方法,误差可尽量减到最小,需注意:测定OD值前,将分光光度计提前预热至少30分钟,可保证准确性;配制好的考马斯亮蓝溶液应放于4度保存备用;盐...
考马斯亮蓝测蛋白质
的问题,为什么测的蛋白质的吸光度比空白低
答:
可能是考蓝工作液放置时间过久失效,可以用标准蛋白比如BSA验证一下考蓝工作液是否正常 另外考蓝
测蛋白
局限性很大,如果
蛋白质
结果没有疏水基团或者肽键
含量
低,也是有可能和考蓝显色不明显 可以试试别的试剂,比如Folin-酚等等
考马斯亮蓝测蛋白浓度
为什么出现负值
答:
几种可能 1.作标准曲线的时候,标准蛋白样品的浓度不准,或是加入试剂的量有偏差,结果标准曲线的零点吸光度都比你待测的高。2.每种蛋白定量法都有自己的试用范围,如果你的蛋白样品含去垢剂或盐浓度偏高,就会影响结果准确性。3.你的
蛋白浓度
太低,落到了标准曲线的线性范围之外。
用
考马斯亮蓝法测
绿豆芽中
蛋白质
的
含量
为什么那么低
答:
有多低啊,关键是绿豆芽本身
蛋白质含量
已经不高了啊,又不是绿豆。
考马斯亮蓝法测蛋白质含量
的实验失败
答:
原因如下:
考马斯亮蓝
法测定样品中的蛋白质含量,仪器是752N型紫外可见分光光度计,采用牛血清白蛋白(sigma)做标准曲线,问题就出在标准曲线上,考马斯亮蓝法
测定蛋白质浓度
是生物化学中的经典实验,是利用蛋白质和染料结合的原理。
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