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考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
简述
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
的过程
答:
简述
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
的过程如下:1、试剂准备:考马斯亮蓝G-250染料需要提前溶解,通常使用乙醇和缓冲液混合配制。同时,需要准备标准蛋白溶液,用于制作标准曲线。2、样本处理:将待测样本与缓冲液混合,然后用组织匀浆器匀浆,保证样本均匀。3、反应:将样本与考马斯亮蓝G-250染料混合,放入...
用
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
是什么?
答:
000μg/ml
,是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。考马斯亮蓝有g250和r250两种。其中考马斯亮蓝g250由于与蛋白质的结合反应十分迅速,常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝r250与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是可以被洗脱下去,所以可以用来对电泳条带染色。考马斯亮蓝法测定蛋白质含量流程 该方法用于...
(Bradford法)如何
测定蛋白
浓度?
答:
0.15mol/L NaCl (ml)10.90.80.70.60.50.4
考马斯亮蓝
试剂 (ml)5555555 摇匀,1h内以0号管为空白对照,在595nm处比色 A595nm 以A595nm为纵坐标,标准
蛋白含量
为横坐标(六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug),在坐标轴上绘制标准曲线。4、样品中
蛋白质含量
的
测定
...
考马斯亮蓝法测定
牛血清
蛋白
的标准曲线?
答:
1、
考马斯亮蓝
试剂:考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,雍蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G—250,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。2、 标准
蛋白质
溶液:纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮
法测定蛋白
氮
含
...
考马斯亮蓝法测定蛋白质
标准曲线
答:
考马斯亮蓝
G一250100mg溶于50ml95%乙醇,加入100ml85%H;PO4,加蒸馏水稀释至 1000ml滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G-250.4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)HPO4。2.标准
蛋白质
溶液:纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮
法测定蛋白
氮
含量
,根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100...
紫外分光光度法和
考马斯亮蓝法
得出的待测
蛋白质含量
呈现怎样的差异...
答:
紫外分光光度法和
考马斯亮蓝法
都是常用的蛋白质
测定
方法,它们得出的待测
蛋白质含量
可能会有一定的差异。以下是两种方法得出的待测蛋白质含量的差异:原理差异:紫外分光光度法是根据蛋白质分子中的共轭双键在280nm波长处有最大吸收峰的特性,通过测量吸光度值来计算蛋白质含量的。而考马斯亮蓝法是一种...
bradford
法测定蛋白质含量
的原理是什么?应如何克服不利因素对测定的影响...
答:
采用Bradford法,即
考马斯亮蓝法测定蛋白质
的含量。原理是考马斯亮蓝在电离状态下呈现棕红色,最大吸光量为488nm。当与蛋白质结合时,它变成蓝色,并且蛋白质与色素结合时在波长595nm处吸收光最大。其吸光值与
蛋白质含量
成正比,可用于蛋白质的定量测定。蛋白与考马斯亮蓝在2min左右达到平衡,反应非常...
考马斯亮蓝法
测
蛋白质含量
是多少?
答:
考马斯亮蓝法
测
蛋白质含量
是0~1 000μg/mL。考马斯亮蓝一定范围内与蛋白质浓度成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。
测定含量
:该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的,但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0.2%影响测定结果,如TritonX-100、SDS、NP-40等...
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
答:
考马斯亮蓝法
是一种常用的蛋白质定量方法。考马斯亮蓝法是一种常用的蛋白质定量方法,原理是考马斯亮蓝G-250与蛋白质分子中的氨基发生显色反应,生成蓝色的复合物,其颜色深浅与
蛋白质含量
成正比。通过
测定
蓝色复合物的吸光度,可以计算出蛋白质含量。该方法具有快速、灵敏度高、操作简便等优点,适用于...
考马斯亮蓝测定蛋白质含量
时应注意什么?
答:
在试剂加入后的5-20min内
测定
光吸收,因为在这段时间内颜色是最稳定的。测定中
蛋白
-染料复合物会有少部分吸附于比色杯壁上,测定完后可用乙醇将蓝色的比色杯洗干净。利用
考马斯亮蓝法
分析蛋白必须要掌握好分光光度计的正确使用,重复测定吸光度时,比色杯一定要冲洗干净,制作蛋白标准曲线的时候,蛋白...
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