BCA法蛋白质定量,简便灵敏

如题所述

揭示BCA法蛋白定量的奇迹:灵敏、快速且不失准确性

在生物科学研究的诸多领域,BCA(Bicinchoninic Acid)法因其卓越的灵敏度和便捷性而独树一帜。这是一种基于双缩脲反应的蛋白质浓度测定神器,其原理是蛋白质在碱性条件下将Cu2+还原成Cu+,形成一种特征性的紫蓝色复合物,其吸光值在562nm处飙升,直接反映了蛋白质浓度的增减。

简便操作,高效测定

BCA蛋白浓度测定法的魅力在于其操作简便性。不论是比色皿法还是微孔板法,Abbkine提供的试剂盒都为用户带来了极大的便利。比色皿法虽然需要100μL的蛋白样品,但1:20(v/v)的工作液比例确保了干扰物质影响降至最低。微孔板法则更加轻巧,只需10-25μL的样品,操作起来如行云流水。

然而,尽管1:8(v/v)的比例对某些干扰物质有所限制,Abbkine的BCA蛋白定量试剂盒#KTD3001系列以其卓越性能,依然提供三种规格供选择,满足不同实验需求。

卓越性能,精准定量

BCA法的亮点在于其强大的性能特点。首先,它的灵敏度极高,最小可检测到0.2μg蛋白质,即使在10μg/mL的浓度下也能精准锁定。其次,它以惊人的速度超越了传统Lowry法,检测时间缩短4倍,让实验时间得以优化。线性范围广泛,从20-2000μg/mL,确保了数据的准确性。

然而,使用BCA法时需谨记,颜色的变化会随时间增长,且反应速度受温度影响。因此,保持恒定的定时和温度至关重要,以确保每一次测定的精确度。

维护试剂,确保结果

BCA试剂A和B的保存需格外注意,若发现沉淀或细菌污染,务必在37ºC温育并搅拌溶解,以免影响实验结果。规范的操作流程,精确的上样量,以及每次测定前制作标准曲线,都是保证BCA法蛋白定量结果稳定的关键步骤。

最后,为了实验安全,务必穿着实验服,戴上一次性手套,确保操作过程无菌无污染,这既是对自己负责,也是对实验结果的尊重。
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