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采用紫外光吸收法测定样品的核酸含量,有何优点及缺点
如题所述
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推荐答案 2015-04-14
所有对260nm附近波长的紫外线有显著吸收的物质都会干扰紫外线吸收法测定核酸的含量实验。实验中主要是蛋白质。用
苯酚
-氯仿-
异丙醇
法纯化核酸样品可以去除蛋白质。
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采用紫外光吸收法测定样品的核酸含量有何
优
缺点
答:
用紫外光吸收法测定样品的核酸含量,
具有简单、快速、灵敏度高的优点
,并且待测核酸样品中含有的微量蛋白质和核苷酸等吸收紫外光物质,产生较小测定误差。 但该法在测定样品内混杂有大量的上述吸收紫外光物质时,则会产生较大测定误差,需要设法事先除去。
紫外
可见分光光度计法测
核酸含量有何
优
缺点
答:
方便,灵敏
,除了知道含量,还知道组成成分。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。在最大吸收波长...
紫外吸收法测定核酸含量
答:
核酸对紫外光的最大吸收凤位于260nm处
,而蛋白质位于280nm处,260nm的吸收仅为核酸的1/10,因此蛋白质含量较底时对实验影响不大;当样品中蛋白质含量较高时,将样品移至试管中,加入一定量稀盐溶液,用玻璃棒小心搅拌,使蛋白质沉淀。滴加少量25%SDS溶液,边加边轻轻搅拌。加毕,在60℃水浴中保温...
简述
紫外吸收
、定糖、定磷
法测定核酸
的特点。
答:
答案】:(1)
紫外吸收法
在一定pH下
测定样品的紫外吸
光度(A260),即可由下式计算样品中
的核酸含量
:C=Mr×A260/ε×L其中:C为核酸的含量(mg/mL),Mr为相对分子质量,A260为核酸溶液的吸光度,ε为摩尔消光系数(即1升溶液中含1摩尔
核酸的光吸收
值),L为比色杯的内径(cm)(2)定糖法RNA的测定...
用紫外
分光光度
法测定核酸的缺点
有哪些
答:
若样品内混杂有大量的上述
吸收紫外光
物质
,测定
误差较大,应设法事先除去.由于降解或水解作用
,核酸的
光密度可以增高约40%,这就是众所周知的增色效应(hyperchromic effect).在大分子
的核酸
中,氢键和π-键相互作用改变了碱基的共振行为.因此,核酸的光密度低于构成它的核苷酸的光密度,该现象称为减色效应(...
大家正在搜
可用于测量生物样品中核酸含量
核酸的紫外吸收波峰是
核酸对紫外线的吸收主要由
核酸对紫外线的最大吸收值在
核酸的紫外线吸收性质
核酸的紫外吸收特征
核酸紫外吸收的最大波长
核酸对紫外线的吸收结构
核酸含量及纯度测定
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