我知道公式OD260×稀释倍数×40µg/ml
但稀释倍数是哪个呀?
我是用50µl溶的RNA,后取2µl稀释到200µl测得吸光度。
我的OD260是0.154那么我的RNA浓度是多少?提取的RNA总量是多少呢?怎么算?
RNA浓度通常计算为1OD =40μg/ ml。
将2μl样品稀释至200μl,稀释倍数为100x,因此提取的RNA浓度为0.154×100×40μg/ ml =616μg/ ml。
由于RNA量为50μl,提取的RNA总量为616μg/ ml×50 / 1000ml =30.8μg。
扩展资料
计算原理:
蛋白中trp、tyr、phe的吸光度为280nm,所以280nm常用来表示蛋白质吸光度;而260nm为DNA的吸光度。
理论上,纯的RNA情况下:OD260/OD280的值为2,纯的DNA情况下:OD260/OD280的值为1.8。
OD260反映的是溶液中核酸的浓度,OD280反映的是溶液中蛋白质或者氨基酸的浓度。
样品中如果含有蛋白质及苯酚,A260/A280比值会明显下降。对于纯的样品只要读出260 nm 的A值即可以算出含量。通常以A值为1相当于50微克/ml 双螺旋DNA,或者40微克/ml 单链DNA,RNA,或者20微克/ml 寡核苷酸计算。
参考资料:百度百科-OD260/280比值
参考资料:百度百科-RNA